RAPD指纹图谱在生药鉴定研究中的应用.pdfVIP

全国中医药研究暨中医药科室管理学术研讨会论文汇编 RAPD指纹图谱在生药鉴定研究中的应用 杨美华 中国军事医学院(100850) l 中药指纹图谱的研究现状 1．1 薄层色谱(TLC)指纹图谱 具有快速、经济、可靠、操作简单、适用范围广、重视性好等特点，为国内外学者最 快接受和广为使用。 林明美等对柴胡10胀品种40样品进行了薄层指纹分析。结果发现，皂甙d、a、c为 柴胡属植物的特征性成分。不同品种的柴胡，凡药材来源、外形区别显著者，其指纹图谱 差异也显著，因此可根据图谱去推断药材的品种。 1．2高效液相色谱(肌C)指纹图谱 具有分离效能高、分析速度快等优点，近期已广为普及用于中药的定量分析。在中药 的定性鉴别中亦能发挥很好的作用。 洪筱坤等对3种正品大黄的9个样品进行HPLC分析，将相对保留值和峰面积两者结 合起来，建立了大黄样品的HPL-相对保留值指纹图谱，反映了该中药的化学组成及其含 量分布状况，其特征可作为鉴别中的依据。 1．3气相色谱指纹图谱 具有高效、高选择性、高层敏度、用量少和分析速度快等优点。叶崇义等采用程度升 温志细管GC法，分析挥发油成分，建立了术类药材指纹谱。 1．4高效毛细管电脉(肿CE)指纹图谱 在药材鉴定中的应用是近年发展起来的方法。 张朝晖等对12种海马、海龙类药材采用HPCE图谱鉴别研究表明，其种间区别。作 者认为HPCE具分析速度快、分辨率强、重现性好等特点，为动物类药材的鉴定提供了新 的分析手段。 1．5紫外光谱(UV)指纹图谱 由于不同中药所含成分的不饱和程度有差异，因而导致其紫外吸收曲线的形态、峰位、 峰强度亦有差异以此达到鉴别的目的。 张亮等不经分离直接测定32种石斛药材粉末氯仿浸出液的UV光谱。运用主成分分析 法进行综合分析，获得满意效果。 1．6红外光谱(m)指纹图谱 IR是对整个化合物分子的鉴别，比单纯的官能团的化学定性鉴别专一性更强。中药材 的红外光谱是混合物中各组分红外光谱的叠加。 ·55· 全国中医药研究暨中医药科室管理学术研讨会论文汇编 田进国等分别用石油醚、乙醚、水提取灵芝、苦地丁、罂粟壳30种药材对照晶，并 分别测定其提取物的红外光谱。这30种药材对照品均具有独特的红外光谱特征，根据其 光谱特征可以准确地加以鉴别。 1．7核磁共振(NMR)指纹图谱 具有单一陛、全面陛、定量陛、易辨陛的特点。 秦海林等对人参、天麻、黄连、虎杖、何首乌和掌叶大黄、唐古特大黄分别选择适应 的提取分离工艺，制备其特征总提取物，在NMR波谱仪上测定中药的1HNMR指纹图： 对特征总提物进一步分离，得一单体化合物后，通过结构鉴定和NMR研究，以对指纹图 中的各特征谱线进行归属。结果表明，所研究的各种植物中药的1HNMR指纹图均有高度 的特征性和重现性，同一品种不同产地的样品的IH-NMR指纹图有很好的重现性；人参、 天麻、黄连等多数植物中药特征总提物的IHNMR指纹图主要显示了其活性成分的特征共 振峰。 1．8质谱(MS)指纹图谱 将中药提取液置质谱仪中进行电子轰击电离，可获得提取液中化学成分的EI．MS图， 不同中药提以液所含成分不同所得质谱图显示的分子离子峰及进上小的裂解碎片峰亦不 一致，可资鉴别。 1．9 X．射线衍射指纹图谱 具有快速简便、图谱稳定可靠、指纹性强并能立即得知样品组分的特点。 周俊国等对12个不同产地的蛇床子样品进行了粉末X射线衍射分析。作者将不同产 地的蛇床子粉末衍射图谱中的特征标记峰与衍射整体模糊图形相结合，建立了蛇床子的特 征图谱，并阐明了其与同属植物兴安蛇床、碱蛇床的区别，认为该法可用于种内不同产的 样品的鉴别。 1．10DNA指纹图谱 具有重复性好、灵敏度高的优点。由于DNA分子标记直接分析的是生物的基因型而 非表现型。所以鉴别结果不受环境因素、样品形态(原品、粉状或片状)和材料来源的影 响，因此可为中药品种鉴别提供更别准确可靠的手段。其中主要包括有随机扩增的DNA 多态性(PAPD)和任意引物扩增的PCR(AR．PCR)等。 目前主要应用