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- 2017-08-29 发布于江苏
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荧光定量PCR设备使用标准流程
开机步骤：
打开电脑；
打开定量PCR仪基座部分开关；
打开定量PCR仪光学检测部分开关；
双击电脑桌面上“”图标；
等到钨灯预热15分钟以上再开始检测。
实验设置：
打开操作软件并联机正常后点击“”图标；
点击下图所示“Protocol”按钮：
选中检测项目的目录，如下图：
选中所使用的试剂盒的程序名称，如下图：
点击下图所示“Plate”按钮：
如下图所示，双击“Create New”按钮，进入板设置页面：
如下图，点击“Select/Add Fluorophores”，进入荧光素选择页面：
如下图，在荧光素列表中选择所使用的荧光素种类，如“FAM”：
选择好荧光素后，点击“OK”
如下图在板设置页面中选择样品类别，然后定义该类样品所在的孔：
然后输入样品体积、样品管的类型等参数：
给办设置文件起名保存即可：
然后点击“Run Set”，再点击“Run”，进入运行起始界面：
如下图所示，在运行起始界面中，点击“Begin Run”：
输入要保存的数据文件的名字，点击“保存”即可：
结果分析：
实验结束后，点击“”图标，进入分析页面：
如下图，在扩增曲线图上点击鼠标右键，选中“BaseLine Threshold”，点击，进入域值线设置页面：
选中“User Defined”，点击“Select All”，然后点击“Edit Range”：
按照试剂盒说明书的要求输入计算基线的循环数范围，点击“OK”：
再点击“OK”：
在分析界面中选中“Threshold Cycle”，仪器会自动计算出个样品的Ct值，记录各样品Ct值；
根据试剂盒的说明对个样品Ct值进行判断，判定样品是否为阳性。
关闭设备
首先关闭软件；
再关闭定量PCR仪光学检测部分开关；
然后关闭定量PCR仪基座部分开关；
最后关闭计算机。
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