动物细胞融合和单克隆抗体17中.pptVIP

* * 1、写出动物细胞核移植过程所涉及到的技术手段。 复习检测 2、现有A、B两种植物，写出 “杂种植株AB”的培育过程。 细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植 植物细胞A 植物细胞B 去壁 原生质体A 原生质体B 诱导原生质体融合 融合的原生质体AB 再生壁 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株AB 脱分化 再分化 动物细胞融合 与单克隆抗体 莱芜十七中高二生物组 一、动物细胞融合（细胞杂交） 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 不同DNA的两个细胞 灭活病毒诱导细胞融合 融合后的细胞进行有丝分裂 5、动物细胞融合过程 杂交细胞形成的标志是什么？ 6、意义： 一、动物细胞融合（细胞杂交） 克服了远缘杂交不亲和的障碍，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段 7、最重要的用途： 主要用于制备单克隆抗体 主要用于制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、植物细胞全能 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 抗体是由何种细胞产生的？ 2 . 抗体是如何产生的？ ？ 单克隆抗体 淋巴因子 一种抗原 动物体 刺激 一种浆细胞 一种抗体 抗体不纯 筛选单一浆细胞 产量少、纯度低、特异性差 单克隆抗体 4、传统制备抗体的缺点是？ 3、传统制备抗体的方法是？ (不同抗原) (多种浆细胞) (多种抗体) 能产生单一抗体，但不能增殖 向动物体反复注射某种抗原，使动物产生抗体，再从血清中分离抗体 如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 单克隆抗体 问题讨论 提示： 1 . 什么样的细胞可以产生抗体？ 2 . 什么样的细胞可以无限增殖？ 瘤细胞和癌细胞有何区别？ 共同点：两者都有无限增殖的能力 不同点：瘤细胞不能转移 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 单克隆抗体 设计方案： 单克隆抗体制备过程 注射特定抗原 经免疫的B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 杂交瘤细胞 细胞培养（克隆化培养） 筛选（抗体检测） 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 筛选（选择性培养基） 选出杂交瘤细胞 二、单克隆抗体 诱导其融合的方法有哪些？两两融合的细胞有几种？ 选出产生所需抗体的杂交瘤细胞 第一次筛选： 第二次筛选： 获得的B淋巴细胞是否是一种？ 单克隆抗体 筛选 杂交细胞 杂交瘤细胞 体外或体内 细胞培养 筛选 骨髓瘤 细胞 诱导细胞融合 特异性杂交瘤细胞 杂交瘤细胞系 提取 经免疫的 B细胞 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 单克隆抗体的制备过程： 选择性培养基 克隆化培养、抗体检测 注射抗原 免疫 骨髓瘤-骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 B细胞-B细胞 单克隆抗体 什么是单克隆抗体 单： 克隆： 抗体： 单个细胞？ 无性繁殖 抗原 ———— 抗体 特异性结合 特点：特异性强、灵敏度高、可大量制备（产量大）。 * * 1.怎样获得能够产生抗体的B淋巴细胞？ 2.骨髓瘤细胞具有什么特性？ 3.科学家期望杂交瘤细胞有怎样的性状？ 4.细胞融合有哪几种情况发生？怎样筛选出杂交瘤细胞？ 5.杂交瘤细胞在体外培养要用到那种细胞工程技术？