高级食品生化专题二-第1章.pptVIP

一、物质的性质与提取 物质的性质与提取方法的选择 要取得好的提取效果，最重要的是要针对生物材料和目的物的性质，选择合适的溶剂系统与提取条件。生物材料及目的物与有关的一些性状，包括溶解性质、相对分子质量、等电点、存在方式、稳定性、比重、粒度、粘度、目的物含量、主要杂质种类及溶解性质、有关酶类的特征等。其中最重要的是目的物与主要杂质在溶解度方面的差异以及它们的稳定性。 三、生物大分子活性物质的存在特点 1、生物材料组成的复杂性 生物材料中的化学组成十分复杂，不同生物含有不同种类的活性物质。同种生物在细胞与细胞之间、组织与组织之间，由于细胞类型、年龄、分化程度不同都会改变活性物质的组成。 植物：叶绿素、胡萝卜素、花色素类 动物： 细胞色素、原卟啉、 藻类： 藻胆色素 B、生物材料中的生化组成数量大、种类多  目的物与杂质的理化性质如溶解度、 相对分子量、等电点都十分接近。在纯化过程中生物材料中有效成分的生理活性处于不断变化中，它们可能被材料中自身的代谢酶所破坏，或为微生物活动所分解，还可能在制备过程中受到酸碱、盐、重金属离子、机械搅拌、温度的作用改变其生理活性。 四、生物大分子常规的提取方法 选择性提取包含着分离纯化； 沉淀分离包含着浓缩； 从发酵液中分离胞外酶，则不用破碎细胞 离心去菌体后，就可直接进行分离纯化。 选择性溶解和沉淀经常交替使用， 各种柱层析常放在纯化的后阶段 结晶 五、原料的选择 （1）生物的生长期：如凝乳酶只能以哺乳期小牛、仔羊的第四胃为材料，成年牛、羊胃不适用。提取胸腺素应选用幼年动物胸腺为原料。 总之，提取是分离纯化的前提，将经过预处理或破碎的细胞或组织置于一定条件下或溶剂中，使被提取的生物大分子以溶解状态充分的释放出来，并尽可能保持原来的天然状态，不丢失生物活性的过程。 用冷溶剂从固体物质提取的过程可称为浸渍。用热溶剂则可称为浸提，也称浸煮。 六、生物大分子的分离纯化 生物大分子的分离纯化技术包括：生物大分子的分离分析和生物大分子的制备。前者主要对生物体内各组分加以分离后进行定性、定量鉴定，它不一定要把某组分从混合物中分离提取出来。而后者则主要是为了获得生物体内某一单纯组分。 为了保护目的物的生理活性及结构上的完整性，生物产品制备中的分离方法多采用温和的“多阶式”方法进行，即常说的“逐级分离”方法。为了纯化一种生化物质常常要联合几个、甚至十几个步骤，并不断变换各种不同类型的分离方法，才能达到目的。 （一）分离纯化原理 （二）分离纯化初期使用方法的 选择与使用程序 分离纯化初期使用方法的选择与使用的程序： 1．分离纯化初期使用方法的选择 2．各种分离纯化方法的使用程序 3．分离后期的保护性措施 七、生物大分子活性物质的浓缩 （一）盐析法 用添加中性盐的方法来使某些蛋白质（或酶）从稀溶液中沉淀出来，从而达到样品浓缩的目的。最常用的中性盐是硫酸铵，其次是硫酸钠、氯化钠、硫酸镁、硫酸钾等。 八、生物大分子的结晶 * * 生物大分子的分离提取与纯化 专题二 第一章 在提取过程中尽量增加目的物的溶解度，尽可能降低杂质的溶解度，同时充分重视生物材料及目的物再提取过程中的活性变化。 对酶类的提取要防止辅酶的丢失和其他失活因素的干扰。对蛋白质类要防止其高级结构的破坏，即变性作用，应避免高热，强烈搅拌，产生大量泡沫，强酸、强碱及重金属离子的作用。 多肽类及核酸类需注意避免酶的降解作用。提取过程中，应在低温下进行，并添加某些酶抑制剂。 对脂类生化制品应特别注意防止氧化作用，减少与空气的接触，如添加抗氧化剂、通氮气及避光等。 二、生物大分子活性物质的存在方式 1、生物大分子活性物质的存在方式 生物活性物质分为胞内和胞外两种存在部位 胞外: 消化酶 淀粉酶、蛋白质水解酶、糖化酶 难于从消化道收集，只能由相应的腺体提取分离。 胞内: 细胞质 RNA 细胞核 真核生物DNA 线粒体 电子传递系统物质、糖类、脂肪酸 氧化分解的酶类 对于胞内物质的提取要先破碎细胞，对于膜上物质则要选择适当的溶剂使其从膜上溶解下来。 2、生物大分子间的作用力 作为生物大分子，其基本骨架中各原子与基团间都是共价结合，整个分子的一级结构比较稳定，但分子间的连接主要是通过一些非共价键如氢键、盐键、范德华力、碱基堆积力所维系，其键能较弱，它们与生物分子的生物功能关系十