三重PCR方法对猪、鸡源细菌中四环素类药物耐药基因的检测.pdfVIP

2013年1月 四川大学学报(自然科学版) Jan．2013 ofSichuan Science V01．50No．1 第50卷第1期 Journal University(NaturalEdition) doi：103969／j．issn．0490一6756．2013．01．032 三重PCR方法对猪、鸡源细菌中 四环素类药物耐药基因的检测 夏青青，王红宁，张安云 (四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室，生物资源与生态环境教育部重点实验室， “985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台，成都610064) 摘要：针对GenBank上已公开的四环素类耐药基因￡P￡A、￡以C、据￡M序列进行比对分析，设 计特异性扩增引物。建立三重PCR法快速检测方法．结果表明，单重PCR和三重PCR的符合 率为100％．应用本检测方法和传统药敏试验方法(药敏纸片法)对412猪、鸡源细菌的四环素 耐药基因和表型同时进行检测．PCR检测实验结果显示，在412株待检细菌中，￡Pm、￡P￡C、 抛￡M的检出率分别为47．57％，38．35％和34．95％．药敏实验结果表明，待测细茵对四环素的 耐药率最高，为95％；对多西环素的耐药率次之，为92％；对米诺环素耐药率相对最低，为 84％．比较两种方法，发现其检出结果的符合率为88％．说明两种方法具有较高的一致性．本 研究建立了一种猪、鸡源细菌四环素类药物耐药基因三重PCR检测方法，并进行了初步应用． 关键词：四环素耐药性；￡P￡A；￡FtC；tP￡M；三重PCR 中图分类号：S855 文献标识码：A 文章编号：0490一6756(z013)01．0171一06 DetectiOnof resistantinbacterial tetracycline genes a method byusingtripIe—PCR XJA A咒一Yk” Qi行g—Qf竹g，W．ANGH07lg—Ning，ZHANG (AnimalDiseasePreventionandFood ofSichuanProvince。 SafetyKeyLaboratory ScienceInnovative forResource “985”Project Platfom andEnvironmentProtectionofSouthwestem， ofBio-resourcesandEco—environmentof ofEducation， KeyLaboratory Ministry SchoolofLife science，Sichuan 610064，China) University，Chengdu Abstract：PCR were basedon onGenbank．A specificprimersdesigned sequencespublished