马来酰亚胺聚谷氨酸天冬氨酸聚合物偶联性能研究.pdfVIP

第41卷第3期 河南师范大学学报(自然科学版) V01．41No．3 Journal Normal ScienceEdition) Mav．2013 2013年5月 oJ’Henan University(Natural 011703 文章编号：1000—2367(2013)03 马来酰亚胺聚谷氨酸天冬氨酸聚合物偶联性能研究 耿旭h，卢光莉岫，黄静2 摘 获得，能够偶联含巯基的多肽；成为新型药物载体．波长分析和双键鉴定反应显示Mal—PGA—Asp带有马来酰亚胺基 PGA 团；电泳检测表明Mal Asp可以有效偶联P40(还原型多肽)及mGLP1(TCEP还原氧化型多肽)；这为Mal PGA—Asp药物载体广泛应用奠定了基础． 关键词：聚谷氨酸；马来酰亚胺；药物载体；电泳 中图分类号：Q71 文献标志码：A 高分子表面带有的化学基团能够被修饰或装载蛋白酶获得具有特定功能的衍生物口_2]．聚谷氨酸天冬 提高载药量；但不能偶联多肽_3一“．马来酰亚胺基团能够在温和条件下与带巯基多肽发生特异性反应，便于 PGA Asp的偶联性能，为其应用奠定基础． 1材料与方法 1．1主要试剂 (烟台汇友硅胶开发有限公司)；低分子量标准蛋白(北京鼎国生物技术发展中心)；马来酰亚胺单甲氧基聚乙 000 二醇(mPEG—Mal，Mw为20 Aesar)；其他化学试剂均为分析纯． 1．2方法 1．2．1 Mal—PGA NME和37 h，经 Asp的制备400mg mgPGA—Asp在氮气保护下，使用催化剂反应48 过萃取透析纯化过程，冷冻干燥获得Mal—PGA—Asp，具体制备方法参照文献报道¨_7j． 1．2．2MalPGA 光谱． 1．2．3Mal—PGA—Asp碳碳双键的鉴定将样品点于薄层层析硅胶板上，侵入0．12％高锰酸钾溶液(o．3g， 溶于250mI．蒸馏水)中几秒，迅速取出观察颜色变化． 1．2．4Mal—PGA—Asp偶联功能检测Mal—PGA—Asp或mPEGMal与P40(还原型)的偶联反应条件为 h后用SDSPAGE电泳检测产物．mGLP 4。C和pH值中性，12 1(实验室制备的氧化型)在4。C条件下用 TCEP还原12h，其还原产物与Mal PAGE电泳检测． PGA—Asp进行偶联，产物用SDS 收稿日期：2013-0123 基金项目：国家自然科学基金 作者简介：耿旭(1976一)，男，河南虞城人，河南大学讲师，主要从事生物医药材料研究． 通信作者：黄静，女，广西桂林人，华东师范大学副教授，E—mail：jhuang@bio．ecnu．edu．cn 万方数据 118 河南师范大学学报(自然科学版) 2 结 果 2．1 Mal—PGA—Asp的制备 见图1b． 2．2 Mal-PGA—Asp的马来酰亚胺 基团鉴定 Mal—PGA-Asp进行200～ 400 am波长扫描，其在300nm处有 吸收峰，与文献报道的马来酰亚胺 HzN＼／＼N …一c—Hc2一Hc2一Hc一器一． H 基团吸收峰位置一致(图2a)[8]．与