五味中草药对大肠杆菌生物膜形成的影响.pdfVIP

Animal Medicine2013V01．45No．7 HusbandryVeterinary 黪溪热 五昧中草药对大肠杆菌生物膜形成的影响 豳 喻华英，何靖 (塔里木大学动物科学学院，新疆阿拉尔市843300) 摘要：生物膜是细菌分泌的多糖、纤维蛋白、核酸、磷脂、脂质蛋白等含水聚合性基质构成，膜内细菌有很强的耐药性，给临床治疗带来很大 困难，本试验利用96孔微板法研究苦豆子、金银花、黄连、连翘、夏枯草5味中草药对大肠杆菌生物膜形成的影响，为临床上治疗大肠杆菌引 起犊牛腹泻病提供新的理论依据。结果显示：随药物浓度的升高，黄连、苦豆子、金银花和连翘在抑制细菌生长的同时，也抑制细菌生物膜的形 成；而夏枯草在抑制细菌生长的同时，细菌生物膜的生长呈现增强的趋势。 关键词：生物膜；中草药；大肠杆菌 中图分类号：R378+1；R272文献标志码：A 文章编号：0529—5130(2013)07—0074—04 细菌生物膜(BF)是指附着于有生命或无生命 1材料与方法 物体表面被细菌胞外大分子包裹的有组织的细菌群 体…。BF中存在各种主要的生物大分子如蛋白质、 1．1主要材料 多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂和磷脂等物质。可形 大肠杆菌13—2来自临床犊牛腹泻的粪便中分离 成这种生物膜的细菌有铜绿假单胞菌、枯草杆菌，沙 Costar 门菌、志贺菌、变形杆菌、绿脓杆菌、炭疽杆菌、蜡 产品；LB培养基、5xM9培养基为BDFalcon产品； 样芽胞杆菌、葡萄球菌等，形成生物膜的细菌对抗生 素和宿主免疫防御机制的抗性很强，成为临床上难治 Wave 性感染的重要原因之一。 海棱光技术有限公司)。 中草药提取物对大肠杆菌耐药性及耐药质粒的消 1．2中草药提取物的配制 除已经取得了初步效果旧J。国内已有用黑木耳、黄 苦豆子、黄连、金银花、连翘、夏枯草购自阿拉 连对大肠杆菌生物膜形成影响的报道旧4J，同时也有 尔中草药店。称取每种药物20g，每次加水60mL， 浸泡30min，反复3次，最后加入200mL，用温火 学者进行了相关中草药对大肠杆菌的抑菌试验∞’5‘8]。 煎熬1h，最后获得药液的量为20mL，使得药液浓 大肠杆菌可直接在人体组织及器官(如消化道、 度为1g／mL。纱布过滤，放到4℃冰箱备用，1周内 尿道、呼吸道等)表面形成生物膜。由于生物膜有 使用完’5。。 较强的抗逆性，因此难以控制，使细菌对抗菌药物、 1．3抑菌试验 外界环境压力和宿主免疫系统的抵抗力明显增强。大 肠杆菌生物膜的形成，提高了大肠杆菌的耐药性和黏 mL h 冻菌液)于5 LB中，在37℃的摇箱中摇16 附性，导致大肠杆菌出现反复感染。中草药在防治畜 后，在麦康凯琼脂基上活化，挑取单菌落，接种到5 禽疾病，解决抗生素残留和抗药性问题的作用已成为 mL营养肉汤中置于37℃振摇24h；②取培养的摇菌 兽医药理学研究热点之一。同时中药在治疗慢性感染