富含脯氨酸和谷氨酰胺的剪切因子-预测血液肿瘤耐药的潜在靶点.pdfVIP

·646· ·论著· 富含脯氨酸和谷氨酰胺的剪切因子： 预测血液肿瘤耐药的潜在靶点 任思楣 刘倩彭洪薇张砚君 熊冬生 张益枝 【摘要】 目的鉴定血液肿瘤细胞耐药相关膜抗原，探讨其在血液肿瘤细胞膜易位表达的普遍 性。方法以蛋白电泳和免疫共沉淀法分离并沉淀细胞膜抗原，以质谱分析鉴定抗原信息，通过siRNA 基因干扰法和激光共聚焦显微镜法确证抗原信息及其易位细胞膜的鉴定结果，通过流式细胞术检测抗 原在多种血液肿瘤细胞膜的易位表达。结果免疫共沉淀和质谱等实验证实白血病耐药相关单抗—— 5D12在HL一60细胞膜抗原为细胞核因子富含脯氨酸和谷氨酰胺的剪切因子(PSF)，经一系列生物学实 验确证PSF在HL．60细胞膜的易位表达，在敏感株的膜表达显著高于耐药株的膜表达。流式细胞术检测 结果表明PSF的特异性单抗5D12与血液肿瘤多种细胞系的膜结合率为：HL一60(78．56±0．76)％；K562 (74．92±3．41)％；CEM(12．18±3．21)％。结论核蛋白PSF易位表达于多种血液肿瘤细胞膜，对维持肿 瘤细胞对化疗药的敏感性有重要作用，是血液肿瘤耐药预测的候选靶点。 【关键词】 多药耐药；PSF；血液肿瘤；靶点；检测 relocatedoncellmembranein a MDR of PSF／SFPQ potential hematologicneoplasia． target tumors NG REN hematologic Si—mei4，LIUQim，PENGHong-wei，ZHAYan-jun，XIONCDong-sheng ZHANGYi—zhi．+NationalClinical Centerfor 100730，China Laboratories，BeijingHospital，Bering author：ZHANG Correspongding Yi-zhi，Email：yz5168@yahoo．corn To cellsurface in 【Abstract】Objective muhidrugresistance(MDR)associatedantigen identify andto the ofmembrane-relocatedofthis in hematologicneoplasiainvestigateuniversality expressionantigen and Themembranewasisolatedand SDS hematologicneoplasia．Methodsantigen precipitatedby wasidentifiedmass siRNAwasusedto CO—immunoprecipitation(CO—IP)，thenby spectrum(MS)．Specific interferewith confocal wasusedtovalidatetheresultsinvolvedin geneexpression，lasermicrosopy antigen information．FACSwas to relocated ofthe in performedana