肠炎沙门菌食物中毒中脉冲场凝胶电泳技术的应用.pdfVIP

浙江预防医学　２０１４年５ 月第２６卷第５ 期　Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｐｒｅｖ Ｍｅｄ，Ｍａｙ．２０１４，Ｖｏｌ２６，Ｎｏ．５ ·５３５ · ·实验技术与质控· 肠炎沙门菌食物中毒中 脉冲场凝胶电泳技术的应用 王晓燕 ，占利 ，叶菊莲 ，罗芸 ，吴爱萍 ，李琳１ ２ ２ ２ １ １ １杭州市上城区疾病预防控制中心，浙江 杭州　３１０００９；２浙江省疾病预防控制中心 摘要：目的　探讨３ 起同地连续发生的肠炎沙门菌食物中毒分离株之间的分子流行病学关系。方法　参照 ＧＢ４７８９４—２０１０ 和ＷＳ／Ｔ １３—１９９６ 的方法进行病原分离培养，对检出菌株进行表型鉴定；采用ＷＨＯ推荐的改 良Ｋ－Ｂ法对检出菌株进行抗生素敏感试验；采用脉冲场凝胶电泳 （ＰＦＧＥ）分型方法对检出菌株进行分子分型 和流行病学特征分析。结果　１４４份粪便及肛拭样本中检出２３株肠炎沙门菌，其中３株从冷菜厨师肛拭中检出； ５４份留样食物中检出４株肠炎沙门菌 （均为冷菜）；共计２７ 株菌。血清抗原式均符合 ［９：ｇ，ｍ：］；生物学性 — 状和药敏试验结果一致；ＰＦＧＥ带型完全一致。结论　这３ 起食物中毒由肠炎沙门菌污染引起；ＰＦＧＥ技术适用 于菌株鉴定和溯源，以实现追踪传染源的目的。 关键词：食物中毒；肠炎沙门菌；血清学鉴定；耐药性；脉冲场凝胶电泳 中图分类号：Ｒ１５５３＋１；Ｒ４４６５　　文献标识码：Ｂ　　文章编号：１００７ －０９３１ （２０１４）０５ －０５３５ －０３ 　　沙门菌是广泛分布于自然界的人兽共患病原 中毒事件结果的判定提供实验数据，现将检测结果 菌，是细菌性腹泻暴发流行最常见的病原菌之一。 报道如下。 沙门菌全球范围已发现超过２ ７００ 种血清型，我国 １　材料与方法 已分离到超过３００种。在国外报道中，沙门菌已成 为引起食源性疾病和食物中毒最多的细菌［１ －２］。肠 １１　材料 炎沙门菌是引起食物中毒最常见的病原菌，主要存 １１１　菌株来源　２７ 株沙门菌来自３ 起食物中毒 在于鸡蛋和家禽中［３］。沙门菌血清学种类众多， 分离的菌株，质控菌株为金黄色葡萄球菌 ［４］ 分类方法多样性，是一门较复杂的分类学科 。 ＡＴＣＣ２５９２３ 和大肠埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２。 传统的血清学手段在分型方面的分辨率不足，无法 １１２　主要仪器　ＣｈｅｆＭａｐｐｅｒ脉冲场凝胶电泳仪 对肠炎沙门菌引发的食源性暴发事件进行有效溯源 （美国Ｂｉｏ －Ｒａｄ 公司）、浊度仪 （法国 ＢｉｏＭｅｒｉｅｕｘ 和预警。近年来，分子生物学技术发展迅速，已开 公司）；ＳＨＡ －Ｃ 水浴摇床 （江苏金坛仪器厂）； 发出多种分子分型方法，其中脉冲场凝胶电泳 Ｇｅｌ Ｄｏｃ ２０００读胶仪 （美国Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司）。 （Ｐｕｌｓｅ －ｆｉｅｌｄ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＰＦＧＥ）是通过脉 １２　方法 冲电场方向、时间与电流大小交替改变完成分离大 １２１　菌株分离　依照食品微生物学检验沙门菌检 分子脱氧核糖核酸 （ＤＮＡ）片段的一种电泳方法， ［６］ 验（ＧＢ４７８９４—２０１０） 、变形杆菌食物中毒诊断 是从分子水平追溯同源性的金标准［５］。综合血清 标准及处理原则 （ＷＳ／Ｔ ９—１９９６）、食品卫生微生 学分型和分子分型两者的结果，在食源性暴发事件 物学蜡样芽胞杆菌检验 （ＧＢ／Ｔ ４７