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硼替佐米耐药骨髓瘤细胞株的建立及其差异表达蛋白的飞行时间质谱分析.pdf
浙江大学学报(医学版) Vol38No
第38卷第5期 5
OF
2009生 JOURNALZHEJIANGUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) 2009
http：∥WWW．journals．ziu．edu．cn／rned
硼替佐米耐药骨髓瘤细胞株的建立及其
差异表达蛋白的飞行时问质谱分析
朱 蓉1，奚 昊1，李勇华2，姜 华1，邹剑锋1，侯 健1
[摘 要] 目的：建立硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞株，探讨硼替佐米敏感和耐药多发性骨髓瘤细胞
株在蛋白质组水平上的差异。方法：采用硼替佐米浓度递增法诱导NCI—H929细胞株产生耐药株。
blot方法对部分鉴定结果进行验证。结果：采用浓度递增法自骨髓瘤细胞系NCI—H929建立了硼替
24
佐米耐药株NCI—H929B。MTT法检测硼替佐米对亲本NCI—H929和NCI—H929Bh的ICs。，其分
别为20．7nmol／L和487．4nmol／L，耐药倍数为23．5。生长曲线及流式细胞术分析显示NCI—H929
比，NCI—H929B细胞中有11个蛋白点表达明显上调，6个明显下调。对这17个蛋白质点进行
件查询SWISS—PROT数据库，根据匹配片段及氨基酸序列覆盖率等，初步鉴定出14种蛋白质。
Western
blot验证其中一种蛋白质(蛋白DJ一1)，结果与双向电泳鉴定结果基本一致。结论：通过浓
度递增法可建立硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞株。双向电泳结果提示这些差异表达的蛋白质可能与
多发性骨髓瘤对硼替佐米耐药的机制有关。
[关键词]多发性骨髓瘤／药物疗法；抗药性，肿瘤；硼酸化物／治疗应用；吡嗪类／治疗应用；
蛋白质类／分析；电泳，凝胶，双向
733．3
[中图分类号]R [文献标志码]A
Establishmentof a bortezomib—resistantcelllineand
myeloma
differential MALDI一0F—MS
proteinsanalysisby
ZHU Hao，LI Hua，ZOU of
Rong，XI Yong—hua，JIANGJian—feng，HOUJian(Department
Medical 200003，
Hematology，ChangzhengHospital，n已SecondMilitary University，Shanghai
China)
establishabortezomib—resistantcelllineandto
[-Abstract]Objective：To myeloma investigate
cell obtained
itsmechanism．Methods：Bortezomib—resistantNCI—H929line(NCI—H929B)was
by
extracellularconcentrationsbortezomibovera of months．The
of
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