消痰化瘀抗纤方药物血清对HSC增殖的影响.pdfVIP

·1798· 消痰化瘀抗纤方药物血清对HSC增殖的影响 兰咏梅韩涛1 y-6t蕾1(西北民族大学医学院，甘肃兰州730030) 【摘要】 目的探讨消痰化瘀抗纤方药物血清对Hsc增殖的影响。方法正常大鼠血清和药物血清干预传代培养的HSC-T6细胞24h， 制HSC增殖(PO．05)；当高剂量组作用72h时，抑制作用最强，抑制率为21．73％，且增殖抑制率与剂量呈正相关。结论抗纤方药物血清可显著 抑制HSC的体外增殖，而且无明显的细胞毒性作用。 【关键词]肝纤维化；含药血清；肝星状细胞；细胞增殖 【中图分类号)R20【文献标识码】A (文章编号】1005-9202《2011)10·1798-03 stellate 肝星状细胞(Hepaticcells，HSC)是目前研究肝纤维算法…得到大鼠抗纤方水煎液所需高浓度(11．542g／m1)，相 化(HF)发生机制中最受重视的细胞。目前认为，肝细胞坏死 当于成人(70I【g)每日l剂服用量的13．5倍。将中药材用三级 400 水清洗2遍，加入三级水1 ml，浸泡30min，加热沸腾后煎 能激活HSC并使之增殖。HSC活化是HF最终的共同通路，是 HF发生的细胞学基础。消痰化瘀抗纤方(简称“抗纤方”)在 煮30rain，煎煮2次；第二煎加水700ml，两次煎液过滤合并共 900 1．542 临床应用10余年，收到良好效果。本课题组在以往临床应用 mlf2’浓缩至l r,／Inl。将此液体分别用一级水稀释到 基础上，用细胞分子生物学方法探讨抗纤方防治HF的作用机 相当于成人每日1剂服用量的1．5、4．5倍，分别含生药1．282、 3．848 制，为中医药防治HF的临床研究提供实验依据。 S／ml。 1．2．1．2复方鳖甲软肝片水溶液制备将药物研磨为极细粉 1材料与方法 末，与成人正常服用剂量相当，一级水溶解，制成混悬液，浓度 54 1．1材料 mr／ml。 1．1．1 1．2．1．3含药血清制备”’取SD大鼠30只，采用随机数字 细胞株肝星状细胞株HSC．16，购于首都医科大学附 法分为5组，每组6只，雌雄各半。分别为正常血清组、复方鳖 属北京友谊医院肝病研究中心，为SV40转染SD大鼠HSC。 1．1．2动物SD大鼠，30只，180—220g，SPF级，雌雄各半， 甲软肝片组(软肝片组)、抗纤方高剂量(13．5倍)组、中剂量 由甘肃中医学院科研实验中心提供，实验动物质量合格证许可 (4．5倍)组、低剂量(1．5倍)组。除正常血清组灌胃等量 证号：SCXK(甘)2004-0006。 o．9％NaCI注射液，其余各组灌胃相应浓度的药物，分2次灌 服，连续6d。第6天晚，开始禁食，不禁水，第7天按常规量灌 1．1．3药物抗纤方由瓦楞子、当归、茵陈、青皮等七味中药 胃1次。2h后，腹腔注射麻醉，股动脉采血，室温静置4h， 组成，购自甘肃中医学院附属医院中药房。复方鳖甲软肝片 3000 r／min，15ndn，离心分离血清。将同一组动物相同条件下 (福瑞中蒙药科技股份有限公司，批准文号：。