基于抗原表位分析的P-糖蛋白表达研究.pdfVIP

of Medical 2009．V01．34 重庆医科大学学报2009年第34卷第1l期(Journal University No．11) Chongqing ；基础研究文章编号：0253—3626(2009)11—1469-03 基于抗原表位分析的P一糖蛋白表达研究 王祥卫，张远宁，周锋，叶钢 (第三军医大学第二附属医院泌尿外科，重庆400037) 【摘要】目的：对P-糖蛋白抗原表位进行分析和表达研究。方法：联合运用多种方法对P-糖蛋白的二级结构和表面特性进行 分析，运用化学和酶法相结合的技术合成卜糖蛋白基因，再克隆入表达载体pGEX一2T进行表达、鉴定及纯化。结果：位于P- o SDS—PAGE分析，表 达出约29 kD大小的蛋白。结论：该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体或筛选其特异性结合肽，进行靶向治疗等工作奠 定了基础。 【关键词】多药耐药；p-糖蛋白；抗原表位 【中国图书分类法分类号】R737．14 【文献标识码】A 【收稿日期】2009-04—28 of basedon ExpressionP—gIycOprOteinantigenicepitopesanalyses WANG al Xiang-wei，et Second Third Medical (DepartmentofUrology，theAffiliatedHospital，theMilitary University) and wag the analyzeantigenic gene 【Abstract]Objective：ToepitopesexpressP-glycoprotein．Methods：Thetarget synthesizedby combineduseof and vector chemical Khnow extension．The WaSclonedinto synthesis polymerase synthesizedgene expressionpGEX-2T and and were toamino inextracellularof identified expressed，identifiedpurifiedit．Resu／ts：Antigenicepitopes fragmentP-glycoprotein acidresidues82aa一1 indicatedthatthe was 15aa(I)、741a