甘草提取物（GC-3）体外诱导HeLa细胞凋亡及机制研究.pdfVIP

·10798 · 中华临床医师杂志( 电子版)2013 年12 月第7 卷第23 期 Chin J Clinicians(Electronic Edition),December 1,2013,Vol.7,No.23 ·基础论著· 甘草提取物（GC-3 ）体外诱导HeLa 细胞 凋亡及机制研究 商潇云 李鑫 于波 张素霜 杨秀静 李彦坤 曲欣 蔡朋朋 李洪源 【摘要】 目的 探讨甘草提取物（GC-3 ）抑制人宫颈癌HeLa 细胞增殖及诱导HeLa 细胞凋亡的机制。 方法 通过水提取、乙醇沉淀、大孔吸附树脂柱层析，分离提取GC-3 ；四甲基偶氮唑盐（MTT ）比色法检 测GC-3 对HeLa 细胞增殖的影响；透射电镜观察GC-3 诱导HeLa 细胞凋亡的形态学改变；Western blot 测 定25 μg/ml GC-3 不同时间作用于HeLa 细胞后，凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶（PARP ）表达水 平的变化。结果 MTT 检测结果表明，GC-3 能够抑制HeLa 细胞增殖且呈现出良好的时间剂量效应关系， 其中GC-3 作用于人HeLa 细胞12 h 、24 h 和48 h 的半数抑制浓度（IC50 ）分别为35.21 μg/ml 、17.05 μg/ml、 12.07 μg/ml，而对照组顺铂相对应的IC50 分别为20.48 μg/ml 、7.34 μg/ml、8.66 μg/ml。电镜检测可见细胞 表面绒毛脱失，细胞核内染色质凝聚、散在或边集，细胞的核浆比减少，胞质内可见空泡等明显的凋亡细 胞特点。Western blot 检测结果显示，随着GC-3 （25 μg/ml ）作用时间的增加，PARP-1 被激活剪切，其裂 解蛋白Cleaved-PARP-1 24 kD 表达水平随之增高，且从6 h 时起即与正常对照组有显著性差异（P ＜0.05 ）， 呈现明显的时间效应关系。结论 GC-3 在体外可明显抑制HeLa 细胞的增殖和诱导HeLa 细胞凋亡，PARP-1 在该细胞分子凋亡机制中起重要作用。 【关键词】 甘草； 抗肿瘤药； 细胞凋亡； HeLa 细胞； PARP-1 The studies on apoptosis of HeLa cells induced by licorice extract in vitro and related molecular mechanism SHANG Xiao-yun, LI Xin, YU Bo, ZHANG Su-shuang, YANG Xiu-jing, LI Yan-kun, QU Xin, CAI Peng-peng, LI Hong-yuan. Teaching and Research Section Epidemic of Disease and Health Statistics ，School of Public Health ， Harbin Medical University, Harbin 150081, China Corresponding author: LI Hong-yuan, Email: lihy09@ 【Abstract 】 Objective To investigate the apoptosis of human cervical cancer HeLa cells induced by extract of licorice in vitro and related molecular mechanism. Methods GC-3 was extracted by means of alcohol precipitation; Macroporous resin chromatography. 2MTT was used to evaluate the growth inhibition r ate of HeLa cells which were treated by different concentrations of GC-3. Transmission electron microscopy (TEM) were used to observe the cells morphology. Western blot