水稻组蛋白脱乙酰化酶基因HDA705启动子的克隆与表达特性分析.pdfVIP

热带亚热带植物学报 2014，22(11：77～82 JournalofTropicalandSubtropicalBotany 水稻组蛋白脱乙酰化酶基因HDA705启动子的克隆 与表达特性分析 张伟 2，刘勋成 ，赵金会 ，张建霞 ，段俊 (1．中国科学院华南植物园，广州 501650；2．中国科学院大学，北京 1000491 摘要：为探讨水稻(Oryzasativa)组蛋白脱乙酰化酶基因HDA705的功能和表达特性，根据NCBI上登录的水稻HDA705基因 (GenBank登录号 ：AK111861)的序列，克隆了5端2kb的启动子片段proHDA705，并构建了proHDA705：Gus表达载体。通过 农杆菌介导法转化水稻，并获得了转基因株系。GUS检测结果表明，proHDA705仅在水稻的根、茎 、叶及部分颖壳的表皮毛等 器官中表达，而在花器官中不表达，这表明HDA705具有组织表达特异性。 关键词：水稻；组蛋白脱乙酰化酶；启动子；GUS doi：10．3969~．issn．1005-3395．2014．01．012 Cloning andExpressionCharacterizationofHistoneDeacetylaseGene HDA705PromoterinRice(Oryzasativa) ZHANGWei ，LIU Xun．cheng，ZHAO Jin．hui，ZHANG Jian．xia，DUAN Jun (1．SouthChinaBotanicalGarden,ChineseAcademyofScienees，Guangzhou501650，China；2．UniversityofChineseAcademyofSciences，Beijing100049，China) Abstract：InordertounderstandthefunctionandexpressioncharacterofhistonedeacetylasegeneHDA705 inrice(Oryzasativa)，5tterminalpromotersequencewasclonedwithlengthof2kbbasedonriceHDA7o5 sequence(GenBankaccessionNo．：AK111861)．namedproHDA705．TheexpressionvectorofproHDA705：GUS wasconstructed．TheproHDA705：GUSvectorwastransformedtoricebyAgrobacterium—mediatedassays．GUS stainingassaysoftransgenicriceshowedthatproHDA705expressedonlyinroot，stem，leaveandsomeepidermal hairofseedcoat。butdidnotinflower．Itwassuggestedthat月DA7D5hadtissuespecificexpressioninrice． Keywords：Rice；Histonedeacetylase；Promoter；GUS 组蛋 白脱乙酰化酶(Histonedeacetylase，HDAC) 酵母 SIR2蛋 白同源的SIR2家族[5]。植物HDACs 通过去乙酰化作用移除染色质组蛋白上的乙酰基， 广泛参与植物的生长发育及对逆境的响应过程 从而改变染色质的结构并抑制基因的转录[I。目 中6【】。目前在水稻中已鉴定出18个HDACs成员， 前，已有多种HDACs在不同在植物 中被鉴定出 HDA705属于RPD3／HDA1家族成员L7J。 来，根据它们与酵母HDACs序列的相似性，可划 启动子是一段位于基因上游，能与RNA聚 分为3大类，一是与酵母 RPD3和HDA1同源的 合酶及转录因子特异结合、决定基因转录起始的 RPD3／HDA1超家族；二是从玉米(Zea y)中首 DNA序列。启动子由核心元件和上游元件构成[8]。 次鉴定出来的一类植物特有的HD2家族；三是与 植物基因工程中常用的启动子按功能及作用方式 收稿 日期：2Ol3_04_17 接受 日期：2013—05-22 基金项 目：广东省科技计划项~(2011A020102008