靶向包膜蛋白的HIV进入抑制剂非感染性定量筛选方法的研究.pdfVIP

201 SouthMed 0；30(5) 南方医科大学学报(J Univ) 靶向包膜蛋白的HIV进入抑制剂非感染性定量筛选方法的研究 李珉珉1，夏承来2，毛芹超27姜世勃筇，刘叔文2(1暨南大学附属第一医院临床医学检验中心，广东广州 510630；2南方医科大学药学院，广东广州510515；3美国纽约血液中心LFK研究所，纽约NY10021) 摘要：目的HIV包膜蛋白能介导细胞与细胞之间的融合，本项目旨在建立一种靶向包膜蛋白的HIV进入抑制剂非感 检测B．半乳糖苷酶的表达。用特异性的HⅣ进入抑制剂对检测方法进行验证。结果HL2／3细胞与 结合，启动B．半乳糖苷酶的表达。CPRG方法能灵敏地检测细胞中13．半乳糖苷酶的含量。特异性的HⅣ进入抑制剂能 够抑制8．半乳糖苷酶的表达，且具有剂量依赖性。结论这一非感染性定量的方法能客观定量地筛选作用于H1V进入 阶段的抗HIV药物，且操作方便、廉价、无感染性．用于天然和合成来源的小分子抗艾滋病药物的筛选。 关键词：HIV进入抑制剂；细胞融合；B．半乳糖苷酶；药物筛选；氯酚红B半乳糖苷 中图分类号：R96 文献标识码：A 文章编号：1673-4254(2010)05．0941．04 Anon--infectiousand cell··based for HIV inhibitors screeningentry quantitative bioassay HIV targetingenvelopeproteins Shu·well2 UMiIl-minl，XIA Shi-bo铂，LIU Cheng-lai2,MAOQin-cha02，JIANG 1CenterofClinicalMedicinal Affiliated ofJman 51 of Laboratory，FirstHospital University，Guangzhou Pharmaceutical Medical Research YorkBlood Sciences，SoutIlem 510515，China；3LFKInstitute，New Center， University,Guangzhou 1002l NewYork．NY To an for detectionofHIV-inducedcell-cellfusionfor Abstract：Objectivedevelopobjectivebioassayquantitative screening HIV inhibitors．MethodsHL2／3cells otherHIV were entry expressingHⅣenvelopeproteinsgpl20／gp41．Tat,andproteins with cells CD4 co-cultured andHIVLTR HeLa—CD4-LTR—B-galexpressingreceptor triggeredreportergeneB·galactosidase． The activitiesof weredetecteda enzyme 13-galactosidase bychromogenicsubstrate，chlorophenol