朵丽蝶兰MADS—box基因DtpsMADS1的克隆与表达特性.pdfVIP

植物研究 2014，34(1)：53—61 BulletinofBotanicalResearch 朵丽蝶兰 MADS—box基因DtpsMADS1的克隆与表达特性 袁秀云 田云芳 蒋素华 王默霏 马 杰 崔 波 (郑州师范学院生物工程研究所，郑州 450044) 摘 要 植物MADS—box基因家族编码高度保守的转录因子，参与了包括花器官发育和开花在内的多种发育进程。 为阐释兰科植物成花的分子调控机制 ，根据MADS—box基因保守序列设计简并引物，用 RACE方法从朵丽蝶兰花葶 中克隆到 1个MADS—box家族基因，该基因cDNA全长960bp，包含37bp5UTR，一个 738bp的开放阅读框 (ORF) 和 185bp3UTR，共编码245个氨基酸。序列和系统进化树分析表明，该基 因与其他植物的MADS—box基因具有很 高的同源性，属于AP1／FUL—like亚家族，命名为DtpsMADS1，GeneBank登录号为 ]Q065097。实时荧光定量PCR检 测结果显示：DtpsMADS1具有明显的组织表达特异性；在根和叶中，DtpsMADS1在花前期和花后期表达量较高；苗期 和盛花期表达量较低；DtpsMADS1在花葶中的表达趋势与根和叶相似；而在花器官中，DtpsMADS1只有痕量表达。 由此推断，DtpsMADS1可能参与开花进程调控，而不参与花器官的形态建成。 关键词 MADS—box基因；开花进程；ARCE；系统树；朵丽蝶兰 中图分类号：S682．31 文献标志码：A doi：10．7525／j．issn．1673—5102．2014．01．008 CloningandExpressionAnalysisofDtpsMADS1Genefrom Doritaenopsishybr~ YUAN Xiu—Yun TIAN Yun—Fang JIANGSu—Hua WANGMo—Fei MA Jie CUIBo (InstituteofBioengineering，ZhengzhouNormaluniversity，Zhengzhou 450044) Abstract PlantMADS—boxgenesencodeafamily ofhighly conserved transcription factorswhich involved in manydifferentdevelopmentalprocesses，includingfloralformationandflowering．Toelucidatethemolecular mechanismsoffloraldevelopmentinthemon0cotyled0nousspeciesDoritaenopsishybrid，weisolatedcDNA ofa MADS—boxgenefrom thisplantbythemethodof3 and5 rapidamplificationofcDNA endsusingdegenerate primersdesigned according to theMADS—box protein family conserved region rfom inflorescence rachisat floweringstage．ThefulllengthcDNA ofthisgeneis960bp，witha37bp5 UTR，anORFof753bpand185 bp3 UTR encoding245putativeaminoacids．Sequenceandphylogeneticanalysisindicatedahigh degreeof predictedproteinsequenceidentitywiththoserfom otherspecies．ThegenebelongstotheclassofAP1／FUL—like groupofMADS—boxgenesandwastermedasDtpsMADS1(accessionNo．JQ065097)．Real-timequantitativePCR (qRT—PCR)resultsshowedthatDtpsMADS1hadobviousexpressionspecificityindifferentorgans；Dtps