基于CHD基因序列分析的帝企鹅性别鉴定研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2010，38(3)：l167—1168，1214 责任编辑 姜丽 责任校对 卢瑶 基于 CHD基因序列分析的帝企鹅性别鉴定研究 沈玮，潘少坤，罗红梅，刘伟，朱标，曹祥荣 (南京师范大学生命科学学院，江苏南京210046) 摘要 [目的]分析帝企鹅(p forsteri)CHD基因序列，以鉴定性别。[方法]采用苯酚：氯仿抽提法提取6只未知性别的帝企鹅血 液中的基因组 DNA，运用P2／P8引物扩增CHD基因片段 ，将PCR产物克隆到T—Vector，利用NCBI的Blast程序，以短趾鹰(Cireaetus - licus)同源序列为比对参照，将帝企鹅CHD基因片段序列与GenBank中的基因片段序列进行同源性比较分析，鉴定帝企鹅的性别。[结 果]剥序结果表明，CHD-Z和CHD—W基因的PCR产物大小分别为378、387bp，雌雄结果并不明显，不易区分开来。Blast比对结果表明， 帝企鹅LD、EK、ZF为雄性，帝企鹅DG、YA、YY为雌性。[结论]结合PcR扩增和测序分析CHD基 因，是单态性鸟类性别鉴定的有效和 准确的方法。 关键词 帝企鹅；CHD基因；测序；性别鉴定 ． 中图分类号 S835 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2010)03—01167—02 StudyonSexIdentificationofEmperorPenguin(Aptenodytesforsteri、BasedOilSequenceAnalysisoftheC肋 Gene SHENWeietal (CollegeofLifeSciences，NanjingNormalUniversity，Nanjing，Jiangsu210046) Abstract f0biectivefTheresearchaimedtoanalyzetheCHDgenesequenceofEmperorPenguin( tenodytesforsteri)toidentifyitssex． 1Method]ThegeneticDNAwasextractedfromthebloodof6A．forsteriwhichsexwasunknown．ThePCRamplifiedfragmentswithprimers P2／P8wereclonedinT—Vector．TakinghomologoussequenceofCircaetusgallicusasreference．theCHD genesequencewascomparedtothe homologuesinGenBanktoidentifyitssex．fResult]I’hesequencingresultsshowedthatthePCR productsofCHD—ZandC肋 一W were 378、387bprespectively．andsexcharacterwasnotsignificantfordividingsex．TheBlastcomparativeresultsshowedthatA．[o~tenLD，EK andZFwasmale．andA．[orsteriDG．YAandYYwasfemale．1ConclusionjrrhemethodofcombiningPCRamplificationandsequencingto analyzetheCHD geneisanaccurateandreliablewaytodeterminesexofmonomorphicavian． Keywords EmperorPenguin(Aptenodytesforsteri)；CHDgene；Sequencing；Sexidentification 皇帝企鹅 (Aptenodytesforsteri)，简称帝企鹅EmperorPen- 胸类鸟类都具有CHD-W基因 。目前，引物P2／P8已成 guin，是现存企鹅家族中个体最大的，是企鹅世界 中的巨人。 为运用CHD基因进行鸟类性别鉴定最普遍的引物。为此， 帝企鹅在分类学上属企鹅 目企鹅科王企鹅属，它是一种单态 笔者选用了引物对 P2／P8扩增性别基因CHD上的特定片 性鸟 ，其性别(尤其是在幼鸟时期)无论是从外观上