“顽拗”植物春石斛基因组DNA的提取研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sci．2010，38(3)：1156—1159。1166 责任编辑 姜丽 责任校对 卢瑶 “顽拗’’植物春石斛基因组DNA的提取研究 郑泉 ，郭维明 ，郑勇平。，王广东，范文峰 (1．南京农业大学生命科学院，江苏南京210095；2．南京农业大学园艺学 院，江苏南京210095；3．南京林业大学森林与环境学院，江苏南京210040；4．浙江森禾种业集团，浙江杭州 3100212) 摘要 [目的]提取 “顽拗”植物春石斛的基因组DNA，并对其进行质量检测。[方法]采用普通CTAB法、试剂盒法和改良CTAB法提取 10个春石斛品种的基因组DNA，然后分别用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法和荧光AFLP法对3种方法所提取的基因组DNA质 量进行检验。[结果]改良CTAB法所提取春石斛基因组DNA得率较高，基本排除了春石斛体 内多糖等次生代谢物质对基因组DNA质 量的干扰。完全能满足AFLP等分子生物学试验对DNA质量的要求；其他2种方法所提取的基因组DNA则不能满足试验要求。[结论] 改 良CTAB法为较好的适合春石斛基因组DNA提取的方法。 关键词 眷石斛；顽拗植物；基 因组DNA；提取；改良cTAB法 中图分类号 $682．31 文献标识码 A 文章编号 0517—66l1(2010)03一O1156—04 studyonExtractionofGenomicDNA from RecalcitrantPlna tSp1in暑Dendrobium ZHENG Ow etal (CollegeofLifeSciences，NanjingA culturalUniversity，Nanjing，Jiangsu210095) Abstract [Objective]ThelesealchaimedtoextracttllegenomicDNAfromSpringDendrobium，andexamineitsquMi~．[Method]Threediffer- entmethods．GTABmethod．kitmethodandmodifiedCrABmethod，werechosetoextractthehighquMiyt DNAfrom therecalcitrantspringDen- drobium．111enUV spectrophotometermethod．agarosegelelectmphoresisme thodnadfluorescentAn methodwereusedtoexaminethequalityof genomicDNAextractedbv3ex~acfionmethods．R『esdt1nleratiosoftIlegenomicDNAextractedbythemodifideCrABmehtodwerehigher，nad couldmeettherequireofmolecularbiologicalexperiment．ButhtegenomicDNA extractedbyhteothertwomehtodscouldnotmeethtereqIlire． fConclusion]IhemodifideCrABmehtodisgoodandsuitableforextractinghtegenomicDNAfromSpringDendrobium． Keyword~ SpringDendrbium：Recaleitrnatplnat：GenomicDNA：Extraction；ModifiedCTABmethod 春石斛(SpringDendrobium)是热带兰花的一种 ，是石斛 备用。 属(Dendrobium)中原产热带 、春季开花、有着节生花 的种 1．1．2 主要仪器。紫外分光光度计 (岛津 UV-2401PC，Ja— 类…，时下是在国际花卉市场，特别是在 日本、英国、美国等 pan)，MinicyclerT扩增仪 (基因公司，USA)，GelDOC一1000 非常流行的高档盆花品种。目前，这种盆花在我国花卉市场 凝胶分析系统 (基因公司，USA)，ABD77测序电泳系统 上才刚刚被人们认识和喜爱，近年来在国内花卉市场上非常 (