3.24人类PP2Cε基因和WDR25基因克隆及功能研究.pdfVIP

摘 要 从本实验室构建的胎脑文库中得到一条编号为2016e01的cDNA序列，根据 生物信息学分析，发现其与镁离子依赖的丝／苏氨酸蛋白磷酸酶家族具有一定的 同源性。这条cDNA全长3055bp，读框编码的蛋白有360个氨基酸组成，这与 小鼠的PP2C￡蛋白序列具有99％的一致性。因此，我们将这条cDNA命名为人 类PP2C￡基因。这条人类的PP2Ce定位在3q26．1，在基因组上由四个外显子 组成。RT--PCR结果显示PP2Ce广谱表达，其表达量在心脏，胎盘，肺，肾， 肝脏，胰腺中较高。 虽然通过酵母双杂交筛选人胎脑cDNA文库，我们并没有找到找到和人类 PP2C e新的相互作用蛋白，但是在真核表达检测中我们获得一个重要的信息： PP2C￡可能参与了热休克通路以及JNK／p38的信号通路。 我们又从人胎脑cDNA文库中克隆得到一条编码有7个舳repeats的人类新 个氨基酸组成，其氨基酸序列与人的前体mRNA剪接因子17(hPRPl7)具有一定 的同源性。经过生物信息学的分析我们发现WDR25基因定位于14q32，由7个外 显子组成。RT--PCR分析显示WDR25基因在多种组织中表达。 关键词：PP2C￡，WDR25，RT～PCR，MAPKs，SAPKs ABSTRACT fetalbraincDNA with to haveisolatedanovelcDNAfromthehuman libraryhomology We serine／thraonine cDNA the 2C(PP2C)family．The M92+-dependent proteinphosphatase a360一amino—acid is3055in the encodes predictedcodingregion protein bp length．and whichshows tothePP2C￡fromratandmouse．WelermithumanPP2C￡ 99％identity The is tochromosome1 andcontains4exonsRT-PCR gene genemapped 3q26 showsthatthePP2Ceis inhumantissuesandthe analysis widelyexpressed expression levelsin are high head，placenta．1ung，liver,kidney,andpancreasrelatively aS ofthe ofWD areinvolvedindiversefunctionsuch Members largefamily repeatproteins signal transduction，vesicular cell large—scale trafficking，cytoskeletalaSsembly,andcyclecontr01．．By