3.24消化道癌耐药性产生与耐药相关蛋白、错配修复蛋白表达关系.pdfVIP

消化道癌耐药性产生 与耐药相关蛋白、错配修复蛋白表达的关系 硕士研究生：李梅 指导教师：吕 申 教授 专业名称：病理学与病理生理学 摘 要 背景与目的：消化道癌是最常见的恶性肿瘤之一，化疗是对其治 疗的必要辅助手段，而耐药性的产生则是化疗失败的主要原因。多年 来人们一直在寻找抑制和逆转肿瘤细胞耐药性的方法，但仍没取得令 人满意的结果。其重要原因是肿瘤细胞耐药性产生的机制尚不清楚。 肿瘤细胞耐药性的产生涉及到耐药、癌、抑癌、细胞周期、凋亡、错 配修复等多种基因及蛋白表达的变化，是一个多因素参与的复杂过程。 目前研究较多的是耐药相关蛋白，主要有多药耐药基因蛋白(P—gP)、 肺耐药相关蛋白(LRP)、谷胱甘肽S转移酶(GST一Ⅱ)、拓扑异构酶II (TopoII)等。它们通过降低细胞内药物浓度、药物毒性或改变药物 作用靶点等机制参与耐药性产生。错配修复系统的功能是维持DNA复 制的高度保真性和遗传物质的完整及稳定性。错配修复基因功能缺失 时，细胞常会因基因突变聚集而表现为遗传不稳定。近年来，许多人开 始关注错配修复蛋白在肿瘤细胞耐药性产生中的作用，并发现错配修 复功能缺失与肿瘤细胞对烷化剂和铂类等药物的耐受产生有关。本研 究通过检测消化道癌组织、胃癌细胞株BGC823及其耐药株 及错配修复蛋白hMLHI、hMSH2的表达，探讨消化道癌耐药性产生的机 制。 材料与方法：1、MTT法测定23例消化道癌癌细胞对顺铂、卡铂、 ·1‘ 5一氟尿嘧啶、长春新碱、丝裂霉素5种化疗药物的耐受性；免疫组织 化学方法检测它们的耐药相关蛋白LRP、GST一Ⅱ及错配修复蛋白hIJLHl、 hMSH2表达；分析癌组织细胞对化疗药物耐受性与四种蛋白表达之间的 关系。2、细胞培养及逐步递增顺铂浓度、间歇作用体外诱导法建立耐 啶、长春新碱的耐药性；免疫细胞化学方法检测耐药株和亲本株上述4 种蛋白的表达。 为73％与59％，两组间均无显著差别，但均表现出显著相关关系(P 0．05)；癌组织中两蛋白表达未见显著相关关系。癌组hMLHl阳性率 与癌旁组(59％)无显著差别，但其在两组的表达显著相关(P0．05)： hMLHl与hMSH2在癌组织的表达未见显著相关关系：癌组织耐药相关蛋 率对同一种化疗药敏感程度不同的肿瘤组织均无显著差别：对丝裂霉 素随耐药程度的增强，肿瘤组织耐药相关蛋白表达类数增多(P 0．05)，而对另4种化疗药物，耐药程度与肿瘤组织耐药相关蛋白表达 类数无关；对5一氟尿嘧啶，肿瘤组织耐药程度与错配修复蛋自阳性率 呈显著负相关(PO．05)，而对另4种化疗药物，其耐药程度与错配 在两种细胞间无显著差异。 结论：1、化疗药物作用前，癌细胞与其发生母地组织之间LRP、 GST-Ⅱ蛋白阳性率常无显著差别，但宿主间则存在差别。2、化疗药物 作用前，消化道癌癌细胞均可有LRP、GST一Ⅱ表达，其表达程度与癌细 胞对顺铂、卡铂、丝裂霉素、5一氟尿嘧啶原发性耐药有关；化疗药物 ·2‘ 作用后，癌细胞这两种蛋白的表达均增强，这种增强可能为继发性耐 药产生的机制。3、癌细胞对长春新碱的原发性耐药可能与LRP和GST Ⅱ表达均无关。4、癌细胞对部分化疗药物，如丝裂霉素，耐药性的产 参与消化道癌癌细胞耐药性的产生。 关键词：消化道癌；耐药机制；LRP；GST一31．；hMLHl；hMSH2 resistance The of associated relationshipdrug protein， mismatch to resistance expression repair drug p