缺血性脑损伤中血晶素通过抑制MLK3信号通路保护大鼠海马CA1区神经元.pdfVIP

中 国 民族 民 间 医 药 论著 · l10 · Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy T atis 缺血性脑损伤 中血晶素通过抑制 MLK3信号 通路保护大鼠海马 CA 区神经元 刘红芝 刘永民 张 芳 吴 健 付燕燕 宋远见 江苏省徐州医学院基础学院生物学教研室，江苏 徐州 221004 【摘 要】：目的：探讨血晶素对海马cAl区神经元的保护和MLK3表达的影响。方法：将 sD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对 照组、血晶素处理组及溶剂组 。分别采用焦油紫染色和免疫印迹检测大 鼠缺血再灌注后海马神经元损伤和脑组织 MLK3表达的情况。结果： 血晶素处理组与缺血再灌注对照组和溶剂组相比，海马CA 区神经元损伤程度明显减轻，MLK3的表达降低 (PO．05)。结论：血晶素对 大鼠脑缺血后海马CAl区神经元起到很好的保护作用，其机制可能通过降低该区MLK3的表达而实现的。 【关键词】：缺血性脑损伤；血晶素；MLK3 【中图分类号】R743 【文献标识码】A 【文章编号】1007—8517(2010)01一Ol1O—O2 缺血性脑血管疾病已成为不可忽视的病种，它对人们 应2h，洗膜。以NBT／BCIP显色，水洗终止反应。结果用 的健康已经构成严重的威胁。脑部缺血性损伤后神经元会 图像处理仪 (GeneCompany)分析处理。膜上显示 的是各 大量死亡，严重影响脑部功能，因而对神经元的保护是当 组磷酸化蛋白的灰度 ，以假手术组为基准 (假设为 1)，其 前治疗缺血性脑病的一个重要任务。本研究通过观察全脑 余各组的灰度与之相除所得 比值见表 1。 缺血再灌注损伤后血晶素 (Hemin)对大鼠海马 CA 区神 1．2．3 统计学方法。采用 SPSSIO．0统计软件。所得数据 经元的作用和MLK3表达的影响，探讨相关的神经元保护 以 ±s表示。组间比较采用方差分析。P0．05为差异有 机制。 统计学意义 。 1 材料与方法 2 结果 1．1 动物及分组。雄性健康 SD大 鼠40只，体质量 250～ 血晶素能减少海马神经元损伤及脑组织MLK3的表达。 300g，清洁级。将大 鼠随机均分为 甲 (缺血 15min再灌 本实验取甲组的存活神经元数表示大鼠海马CA。区神经元 5d)和乙 (缺血 15min再灌6h)两组，每组又分为假手术 细胞存活情况，用乙组的MLK3数值表示大鼠MLK3的表 组、缺血再灌注对照组、血晶素处理组及溶剂组，每组 达情况。假手术组海马CA。区仅仅有少量细胞凋亡，对照 5只 。 组死亡细胞与假手术组相 比明显增多 (P0．05)，血晶素 1．2 方法 处理组凋亡细胞较对照组和溶剂组明显减少 (P0．05)。 1．2．1 动物模型制备 ．用20％水合氯醛 (300～350mg／kg) 对照组和溶剂组之间差异无显著性 (P0．05)。假手术组 腹腔注射麻醉动物后 ，分离双侧颈总动脉并电凝椎动脉 ]。 MLK3的表达有一定水平 ，对照组较假手术组显著升高 (P 手术第2d于动物清醒状态下结扎双侧颈总动脉，使全脑缺 0．05)，血晶素处理组MLK3的表达较对照组和溶剂组明 血 15min，然后再灌注不同的时间。缺血时保持其直肠温 显降低 (P0．05)。对照组和溶剂组之间差异无显著性 度在 36．5～37．5~C，以缺血动物体征表现判断缺血模型的 (P0．05)。见表 1。 可靠性。假手术组 的处理同实验组 ，但不结扎双侧颈总 表1 海马CAl区神经元存活情况及MIX3的磷酸化