片仔癀调控ABCC1抑制大肠癌HCT_8_5_FU细胞药物外排功能的作用机制研究.pdfVIP

福建中医药 年 月 第 卷 第 期 2014 12 45 6 Fujian Journal of TCM December 2014 ，45 （6 ） 51 ·实验研究· 片仔癀调控ABCC1 抑制大肠癌HCT-8／ 5-FU 细胞药物外排功能的作用机制研究 黄进 明 1 ，沈阿灵 2 ，李琼瑜 2 ，齐 飞 2 ，洪 绯 1 ，陈宏伟 2 ，褚剑锋 2 ，林 久茂 2 ，洪振丰 2 ，彭 军 2 （ 漳州片仔癀药业股份有限公司，福建漳州 ； 福建中医药大学中西医结合研究院，福建福州 ） 1. 363000 2. 350122 摘 要： 目 的 探 讨 片仔 癀 对 大 肠癌 HCT-8／ 5-FU 细 胞 对 药物 外排 功 能 的 影 响 ， 并探 讨 其 机 制 。 方 法 MTT 法检 测 5-FU 对 HCT-8／ 5-FU 细胞和 HCT-8 细胞活 力 的影响和片仔癀 对 HCT-8／ 5-FU 细胞 活 力 的影响 ； 倒 置 显微镜 观察 片仔癀 对 HCT-8／ 5-FU 细胞形态 的影响 ； 采 用 罗丹 明染色通过 流 式 细胞仪 检 测片仔癀 对其在 耐 药 细胞内蓄积 的影响 ； 检 测 转运蛋白 家族重要成 员 的表达 。 结果 检 测 结果显 示 不同 RT-PCR ABC ABCC1 MTT 浓度 的 5-FU 干预 可显著 降低 HCT-8 细胞活 力 ，呈现 一 定的剂 量依 赖 和 时间依 赖 ，而对 HCT-8／ 5-FU 细胞活 力 未 见影响 。 经片仔癀 干预后 ， 细胞活 力也 受到 显著 的抑制 ；形态 学观察表 明 ：随 着 药物 浓度 的升 高 ，细胞 HCT-8／ 5－FU 数 目逐 渐减 少 ，体 积 缩 小 ，出现 悬浮、脱落 而死 亡 ；罗丹 明蓄积 实验 显 示 ：片仔癀 干预 可显著 增加 其在 细胞内 的蓄积 ； RT-PCR 实验表 明 ： 经片仔癀 干预 可显著 下调 HCT-8／ 5-FU 细胞 ABCC1 在 mRNA 水平的表达 。 结论 片仔 癀 可抑制 HCT-8／ 5-FU 细胞生 长和 药物 外排 功 能 ，通过下调转 运蛋白 ABCC1 的表达是 其 重要机 制之 一 。 关键词：片仔癀 ；大肠癌 ；逆 转耐 药 ；5-FU 中图分类号： 文献标志码： 文章编号： （ ） R285.5 A 1000-338X 2014 06-0051-03 DOI:10.13260/ki.jfjtcm.010789 大肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一， 其死亡 1 实验材料 ［ ］ 1 药物和细胞株 人结直肠癌细胞株 率已位于恶性肿瘤第二位，严重危害人类健康 。 大 1.1 HCT-8／ 5- 肠癌的治疗过程中所产生的多药耐药的现象是造成 FU 和