实时定量PCR监测B细胞恶性肿瘤患者造血干细胞移植疗效及预后研究.pdfVIP

中国协和医科大学中国医学科学院硕士研究生毕业(学位)论文 英文缩略词表 Base 碱基对 bp pair CR Completeresponse 完全缓解 Ct atthreshold 循环阈值 Cycle EB Ethidiumbromide 溴化乙锭 酬 bonemarrow 骨髓 LB Luria-Bertanimedium LB培养基 mln Minute 分钟 MNC Mononuclearcel1 单个核细胞 MRD Minimalresidualdisease 微小残留病 oD optical density 光密度值 PCR chainreaction Polymerase 聚合酶链式反应 rpm Rotateminute 每分钟转速 per RQ—PCRReal—。time RT—。PCR quantitative实时定量 PAGEPolyacrylamidegel 聚丙烯酰胺凝胶电泳 s electrophoresi TEMED N，N，N’，N’，一tetramethyleN，N，N’，N’，一四甲基 thylenediamine 乙二胺 GAPDH 甘油醛一3一磷酸脱氢酶 91yceraldehyde一3一phosphate Dehydroge8se in chain IgHImmunoglobulHeavy 免疫球蛋白重链 中国协和医科大学中国医学科学院硕士研究生毕业(学位)论文 实时定量PCR监测B细胞恶性肿瘤患者造血干细胞移植疗效及预后的研究 摘要 干细胞移植(HScT)后残留肿瘤细胞监测的意义。方法采用家族一致性Taq～lan 探针联合等位基因特异性寡核苷酸(ASO)上游引物技术检测22例B细胞恶性肿 瘤患者HSCT前后骨髓单个核细胞的IgH水平动态变化。IgH的水平以内参基因 GAPDH进行归一化。结果1．RQ-PCR实验可重复灵敏度为1个拷贝。2．9 例I酬单克隆重排患者HSCT后一个月，骨髓中IgH的拷贝数较初治时均有明显 103／106 的降低(6．67X GAPDH对29／106 了完全的临床和分子遗传学缓解(CCyR)；5例移植后3个月以内IgH拷贝数持 103／106GAPDH，四 全缓解(cR)。l例患者移植后近3个月时IgH拷贝数为4．5X 个月时临床复发。3．RQ—PCR检测8例干细胞采集物的肿瘤污染水平为3．68×102 (0—1720)／106 GAPDH，n=5对1．1×lOs(527-1720)／108 RQ-PCR检测的8例患者无论肿瘤污染的程度如何临床均无复发。采集物中肿瘤 污染的水平与初治及移植后一个月的IgH水平呈正相关，(r