实验性听觉剥夺对大鼠听力的影响及生长相关蛋白-43在大鼠听皮层中的表达与研究.pdf

中文摘要 实验性听觉剥夺对大鼠听力的影响及 生长相关蛋白一43在大鼠听皮层中的表达研究 摘 要 目的：为了探索听觉系统发育和损伤后修复的神经可塑 性的分子机制，本实验研究了生长相关蛋白一43(growth associated 鼠发育的不同阶段及耳蜗内电刺激后在听皮层的表达变化， 探索GAP．43与幼鼠听皮层发育和可塑性的关系。为听力障 碍儿童的早期发现、早期干预等问题提供理论依据。 方法：1 生后第7天开始用阿米卡星(Arnikacin)500 mg／kg．d皮下注 射，直到生后第16天；(2)早期耳蜗内电刺激组 激持续3小时／天，共7天；(3)晚期耳蜗内电刺激组 激持续3小时／天，共7天；(4)药毒性听觉剥夺对照组 等容量的生理盐水，直至生后第16天；(5)传导性听觉剥夺 塞堵塞双侧外耳道，正常饲养到生后28天；(6)传导性听觉 之后，(1)(4)组于3周龄、4周龄、8周龄时行听脑干反应 中文摘要 定量分析；(2)(3)组于7天后取听皮层做免疫组织化学检 测；(5)(6)组行听脑干反应(ABR)检测。 结果：(1)氨基糖苷类抗生素可致幼鼠双耳极重度感音 dB 神经性聋，ABR阈值103 nI--IL；(2)传导性听力障碍致幼 dB 鼠轻度聋，CAD组动物ABR阈值(35．00-4-17．35nHL)较 dB 对照组(3．64+3．23 nHL)升高，即有显著性差异(PO．05)； (3)免疫组织化学方法：出生后不久(NClP3w)的大鼠听皮层 可见大量表达GAP．43的阳性神经元(111．504-4．90／HP)，随发 育表达逐渐下降。出生后4周(NCl 元数仅约为3周龄时的74％。出生后8周(NClP8w)的大鼠 听皮层仅可见很少有GAP．43免疫染色的神经元 氨基糖苷类抗生素致聋后5天(OAD 性神经元数约为同龄对照的1．3倍。致聋后12天(OAD P4w)， 药组增加了约18％。到致聋后40天(OAD P8w)，GAP．43在 为致聋后5天时的55％，约比同龄对照增加了14％；早期耳 1 中文摘要 内电刺激均可引起GAP．43的免疫反应性更加升高，且表达 方法：在出生后不久(NC。P3w)的大鼠听皮层有较多的 GAP．43 mRNA表达，随发育表达逐渐下降。出生后4周(NCl P4w)，GAP一43mRNA在听皮层只有很少的表达。出生后8 周(NClP8w)，GAP．43mRNA只有微弱表达；氨基糖苷类抗 生素致聋后5天(OAD P3w)，GAP．43mRNA在听皮层有较 多表达，此后便逐渐降低。致聋后12天(OAD P4w)，GAP．43 mRNA的表达就明显减少。致聋后40天(OAD P8w)，只可 见很微弱的GAP一43mRNA的表达。 结论：GAP一43在刚出生大鼠听皮层高表达，随发育表 达逐渐降低；耳蜗损伤后早期GAP．43在幼鼠听皮层的表达 急剧升高后缓慢下降；早期或晚期耳蜗内电刺激后GAP．43 在听皮层的表达反应性升高。综上，GAP．43与幼鼠听皮层 发育和可塑性密切相关，GAP．43可作为听皮层可塑性的重 要标志。 关键词：幼鼠：听觉剥夺；耳蜗内电刺激；GAP一43；听