突变型IκBα对HL-60细胞凋亡和分化作用的初步与研究.pdfVIP

摘要 转录因子r．B(NF-r．B)是基因表达的重要调节子，参与炎症反应、 免疫应答、细胞分化和凋亡。活化后的NF-rB，也能使多种血液肿瘤 细胞逃避凋亡以及抵抗放疗、化疗药物诱导的凋亡作用。相反，抑制 NF．rB活性，可诱导这些细胞凋亡，并增强化疗药物介导的细胞毒性 作用。研究证实，急性髓系白血病(m以L)原代细胞及细胞株如HL-60 细胞中均存在NF—r,B异常活化。目前，国内外针对NF．心活性抑制 剂的研究主要包括四个方面：(1)老药新用。(2)新的NF-r．B抑制剂。 (3)RNAi(RNA 手段能够抑制NF—r．B活性并够诱导细胞发生凋亡，但是也存在一些 问题。例如，传统药物及一些新_Ⅲ．心抑制剂，大多数并不能特异 性抑制其活性，且长期应用对正常细胞还具有毒性作用。而通过小干 扰RNA抑制NF．①活性的相关研究尚处于实验室研究阶段，应用临 床还有相当的距离。尽管，位点突变型Ir．Ba可诱导肿瘤细胞凋亡及 其增殖。然而，迄今未见有关缺失突变型Ir,Ba对HL-60细胞凋亡和 分化作用的研究报道。 目的本研究将携带有N端缺失1．70位氨基酸的Ir．Ba即Ir．Ba AN eDNA的逆转录病毒载体转染HL-60细胞以探讨该缺失突变型 Ird3a对HL一60细胞凋亡和分化的影响。 方法通过阳离子脂质体转染技术，将pCLX．Ir,BaAN重组载体 质粒DNA转移到HL．60细胞。转染48和72小时后，分别收获细胞， AnnexinV以及CDllb的表达。 结果转染后，AnnexinV拥r细胞数增加。并且，转染72小时 数。但是，无论是转染后48小时还是72小时，表达CDllb的阳性 lb阳性数几乎无差别。另外，转染72小 细胞数与未转染细胞的CDl 时后，转染细胞Ir．BamRNA表达明显增加，同时，可检测到Neo基 因mRNA的表达。 结论短暂表达Ird3aANeDNA能够诱导HL一60细胞发生凋亡， 但诱导HL-60细胞粒系分化作用不明显。 关键词白血病，IlL一60，细胞凋亡，细胞分化，突变型Ir,．Ba ABSTACT iSthe factor of regulator NF-kappaB(NF—r,B)transcriptionkeY and acriticalin gene role reaction, expressionplays inflammatory immune differentiationand response，cell studiesshowthatNF-r,Bisactivated in humantumors persistentlymany and thetumorcellsresistanceto induced promote apoptosis by and chemical ofNF—r,Bcan radiotherapy contrast,inhibition drugs．By inducethe oftumor cellsandenhancethe effectof