偶氮苯及其衍生物.pptVIP

实验二 偶氮苯及其衍生物  的分离及鉴定(薄层色谱) 【实验目的】 1．掌握薄层色谱的原理及其特点。 2．熟悉薄层板的制备方法。 3．了解薄层色谱的显色方法。 【实验原理】 薄层色谱（薄层层析）是在柱色谱和纸色谱的基础上发展起来的一种微量、快速而又操作简便的色谱法。与柱色谱与纸色谱相比，薄层色谱具有分离效率高、灵敏度高、应用面广以及层析后可用各种方法显色等优点。 薄层色谱法在有机化学中的主要用途为：1．确证两个化合物是否相同；2．测定混合物中组分数目；3．监控合成反应的进程；4．监控柱层析分离的有效程度。 薄层色谱可用着定性分析外，还可与比色法相配合起来作定量分析。 【实验步骤】 1． 薄层板的制备 （1）清洗薄层板：将载玻片③用肥皂水煮沸、洗净，再用洗涤液浸泡，最后用水洗涤④，烘干，备用。 （2）制板：称取1.2g硅胶G或CF254加3mL蒸馏水，调成均匀的糊状，如有气泡可加1滴~2滴乙醇，均匀涂布于玻片上。在室温下晾干（约30min），再移入烘箱，缓慢升温至110℃恒温活化30min，取出稍冷后，备用。 2．点样 （1）画线：在经活化薄层板一端1cm～1.5cm处，用铅笔轻轻画平行线，并将此线四等分，见图4-5中的点样线。 （2）点样：用3支点样毛细管，分别取少量1%偶氮苯溶液、0.01%对-二甲氨基偶氮苯溶液、偶氮苯和对-二甲氨基偶氮苯混合溶液，分别点在经活化的薄层板距下端1cm～1.5cm处(图4-4)。点样时，应注意垂直地使点样毛细管与薄层板轻轻接触。若一次点样量不够，可待溶剂挥发后重复点样，斑点扩展后直径不超过2mm～3mm。几个点样点必须在同一水平线上。 3．展开 将展开剂5mL倒入层析缸中，盖上盖子让层析缸内蒸气饱和5min～10min。将点好样品的薄层板放入层析缸中进行展开。点样线必须保持在液面之上。当展开剂升到距薄层顶端1cm左右时，取出薄层板，用铅笔轻轻划出前沿线，在空气流通处晾干。 4． Rf值的计算 分别计算出偶氮苯及对-二甲氨基偶氮苯的Rf值，并鉴定样品中各组分属于何种物质。 【注意事项】 （1）若认为制备的薄层板不够牢固时，可采用0.8%的CMC-Na溶液代替蒸馏水制备薄层板。 （2）这是因为当混合剂在薄层板上爬行时，沸点较低的和与吸附剂亲合力较弱的溶剂，在薄层两个边缘易挥发，它们在薄层两个边缘处的浓度比在中部的浓度小，也就是说薄层板的两个边缘比中部含有更多极性较强的溶剂。为避免此现象的发生，防止边缘效应。为此，需预先将层析缸用展开剂蒸气饱和。 ③ 对于一般的定性实验，用载玻片（7.5cm×2.5cm）制成的硬板完全可以获得满意的结果。 ④ 制备所用的薄层板必须表面光滑、清洁。若所用薄层板有油污的部位会发生吸附剂涂不上去或薄层易剥落的现象。 ⑤ 偶氮苯的参考Rf值：0.6；对-二甲氨基偶氮苯的参考Rf值：0.2。 【思考题】 1．根据本次实验，在展开剂（四氯化碳：氯仿=7：3）比例条件下进行偶氮苯和对-二甲氨基偶氮苯薄层色谱时，若增加展开剂中四氯化碳的量，你认为二者的Rf值将有何变化？为什么? 2．在薄层色谱法中，主要有哪些显色方法? * *