产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌的基因型分型及耐药分析.pdfVIP

塞旦匿堂蓥查2Q盟至要—蛰垫尊塑靼 3087 ·检验与临床· 产超广谱13一内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌的 基因型分型及耐药分析 王运铎范艳萍张毅华 摘要 目的：了解犬连市中，心医院产超广谱B一内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯杆菌耐药基因型厦耐药情况。 ESBLs肺炎克雷伯杆苗51株。应用K—B纸片扩散法桂测其对23种临床常用抗生素的耐药性：应用聚合酶链反 曼克雷伯杆菌中，有50株呈阳性。仅携带一种基因型的分别为TEM型1株(196％)．sHv型1株(196％)．CTX． (45．10％)同时携带两种或两种以上基固型．且多为CTX．M型与TEM型或SHV型共同存在。药敏结果显示，碳青 酶烯类抗生素对产ESBIJs肺炎克雷伯杆菌表现出较高的抗苗活性。其耐药率为0．00％．四环素和复方新诺明耐药 率分别为19．61％和27．45％。结论：奉院产ESBLs肺炎克雷伯杆茵流行的主要耐药基因型为CTX。M型．碳青霉烯 类抗生素是目前治疗产ESBLs肺是克雷伯杆茵感染最有效的药物。 。 关键词 克雷伯酋．肺炎13内酰胺抗药性基因型抗药性 beta． 超广谱B一内酰胺酶(extendedspectrum 1actamases，ESBLs)是由质粒介导的能水解青霉素类、 头孢菌素类、单环内酰胺类抗生素的耐药性酶．由于 ATCC25923和铜绿假单胞菌ATCC27853。 作用底物广泛而称之为超广谱B一内酰胺酶，并可在 不同种细菌间传播fI“。ESBLs主要由革兰阴性杆菌 产生㈨，尤其以肺炎克雷伯杆菌为代表。肺炎克雷伯 粒提取试剂盒、聚合酶链反应(PCR)试剂盒均为大连 杆菌是呼吸道感染最常见的病原菌．由该菌引起的医 宝生物工程有限公司产品。毛细管及配套试剂均为美 院感染爆发流行时有报道“j。自1983年在德国首次国ABI公司产品。抗生素纸片为英国OXOID公司产 报道分离出SHV．2型ESBLs以来．全世界许多地方品。 不断有新的ESBLs检出，]。根据基因同源性的不同．1．1．3主要仪器ATB ESBLs可分为TEM族、SHV族、CTX．M族、OXA族及国梅里埃公司产品)、LGl6一W台式高速离心机(北京 一些不属于上述任何一个家族的类型．其中以TEM 族和SHV族种类最多。近年来．CTX—M族、OXA族 产品)、P／ACESystem MDQ毛细管电泳仪(美国 Beckman公司产品)。 ESBLs也在迅速地增多。ESBLs菌株具有多重耐药现 象．对青霉素类、头孢菌素类、氢曲南等抗菌药物有较 1．2方法 高的耐药性，而且耐药基因编码常与其他的耐药基因 1．2．1 ESBLs的筛选与确认采用K．B纸片扩散法 联合而使耐药性更加复杂：“。本研究采用聚合酶链反 对疑似产ESBIs菌株进行初筛试验和确证试验。判读 应一毛细管电泳方法(PCR—CE)对大连市中心医院51 株产ESBLs肺炎克雷伯杆菌TEM、SHV、CTX—M基困(2004年)推荐的标准进行。以大肠埃希杆菌 进行分析．同时应用K-B纸片扩散法测定其耐药情 况，为临床合理使用抗生索提供可靠依据。 ATCC700603作为阳性对照菌株。协同现象见图1。 1材料与方法 1．2．2药物敏感实验采用K．B纸片扩散法。 1．1材料 1．2．3质粒DNA的提取操作过程严格按照说明书 1．1．1实验菌株收集2005年11月至2006年2月