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布洛芬在小鼠体内的分布 课前准备 取小鼠2只,称重，编号。 2号用20％布洛芬灌胃0.1ml/10g。 3号用20％布洛芬灌胃0.1ml/10g。 计时 实验目的 掌握测定药物分布的方法和临床意义。 了解药物在体内的分布动力学规律。 相关知识——药物分布 药物分布的概念： 药物从血液向组织、细胞间液和细胞内液转运的过程。 药物分布影响因素： 血浆蛋白结合率 器官血流量 组织细胞结合 体液pH和药物解离度 体内屏障 血脑屏障、胎盘屏障和血眼屏障 实验步骤1 标准管的制备：0.00125%布洛芬溶液 取小鼠3只（已禁食12h），称重，编号。 1号用生理盐水灌胃0.1ml/10g，立即断头取血摇匀。 2号用20％布洛芬灌胃0.1ml/10g，30min断头取血摇匀。 3号用20％布洛芬灌胃0.1ml/10g，60min断头取血摇匀。 取离心管3支编号，分别于1管（对照）、2管（给药30min）和3管（给药60min）内加肝素0.1ml,断头取血，立即摇匀。分别从3支管中取抗凝血各0.5ml加入已预加无水乙醇4.5ml试管中，摇匀。 称取各小鼠300mg肝组织，分别置于研磨器中，加无水乙醇（0.4ml/100mg）研碎后再加入无水乙醇（0.5ml/100mg） 摇匀，制成匀浆后全部倾入试管中。 实验步骤3 实验步骤4 将对照鼠和各给药鼠的血及组织匀浆离心5min（3500转/分），分别取上清液3.0ml放入比色杯中(稀释） 如果液体太浓，可用蒸馏水按比例稀释，得到的光密度值乘以稀释倍数即实际光密度值。 实验步骤5 用分光光度计在222nm波长下以对照鼠样品管作空白管，测定各用药样品管的光密度值，代入到公式换算出血药浓度(μg/ml)和组织药物浓度(μg/g)。 血药浓度(μg/ml) = 样品管浓度×稀释倍数（10） 组织内浓度(μg/g) = 样品管浓度×稀释倍数（10） 实验后处理 利用计算机绘制给药后血液和肝脏组织中的药物分布图。 注意事项 取血：每次的取血量要准确 血样加至无水乙醇试管应该立即摇匀 匀浆：匀浆器上的数字应对应 组织匀浆后应立即离心 匀浆器应清洗干净 离心：离心前一定要用水配平， 离心管不要弄混 离心后将转速和时间归零 吸管要干净 药品不要污染桌面，台面 灌胃后立即清洗灌胃针头 思考题 试说明布洛芬在各组织内的分布规律及临床意义 * 小鼠灌胃给予同等剂量的布洛芬溶液后，在不同时间点测量血液、脑、肾、肝中布洛芬的浓度，绘出不同时点的布洛芬的组织分布图。 测量血液、肝中布洛芬浓度采用比色法。 实验原理 实验步骤2 肝300mg+无水乙醇（0.9ml/100mg） 60min后 3-2 血0.5ml+无水乙醇4.5ml 60min后 3-1 肝300mg+无水乙醇（0.9ml/100mg） 30min后 2-2 血0.5ml+无水乙醇4.5ml 30min后 2-1 肝300mg+无水乙醇（0.9ml/100mg） 立即取 1-2 血0.5ml+无水乙醇4.5ml 立即取 1-1 离心管内容物 采样时间 编号