丹参对皮瓣缺血再灌注损伤保护作用的实验与研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………4 研究论文丹参对皮瓣缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 前言………………………………………………………………99刖吾……………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………9 结果………………………………………………………………16 附图、附表………………………………………………………19 讨论………………………………………………………………30 结论………………………………………………………………34 参考文献…………………………………………………………34 综述丹参对皮瓣缺血再灌注损伤影响机制的研究进展…………37 致谢……………………………………………………………………47 个人简历………………………………………………………………48 中文摘要 丹参对皮瓣缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 摘 要 目的：通过观察丹参注射液对大鼠缺血再灌注皮瓣成活面积和组织学 变化的影响，以期证实丹参在皮瓣移植术后，防治皮瓣坏死，提高皮瓣移 细胞间粘附分子1(ICAM．1)的含量，初步探讨其作用机制，为临床应 用提供客观的实验依据。 方法： 河北医科大学实验动物中心)。 2动物分组：将大鼠随机分为3组，每组l6只。①非缺血再灌注组(非 ．IR组)：皮瓣形成后原位缝合，不做其他处理。②缺血再灌注组(IR组)： 术前3天至术后5天，每日腹腔注射生理盐水2ml／kg，皮瓣形成后，用微 血管夹夹闭腹壁浅动脉发出点近侧端的股动脉，皮瓣原位缝合，8h后去 除动脉夹，恢复血供。③丹参一缺血再灌注组(丹参一IR组)：将生理盐水换 为丹参注射液2ml／kg，其余操作同IR组。 3皮瓣制备：动物于术前三天用硫化钠脱毛，术时3％戊巴比妥钠 JJ等【6】描述的方法，于右下腹形成 (40mg／kg)腹腔注射麻醉，依据Petty 一以腹壁浅血管为蒂的轴形皮瓣，大小约为3cmx6cm，深至皮下肉膜层， 充分游离腹壁浅动脉发出点部位的股动脉段，微血管夹夹闭其发出点近侧 的股动脉，皮瓣原位缝合。 4取材：IR组和丹参．IR组的8只大鼠于掀起皮瓣后即刻、再灌注后2h、 织部分用4％多聚甲醛即时固定待做石蜡切片及免疫组化染色，部分冰冻 保存至生化检测。于术后7天观察3组中其余8只大鼠皮瓣成活情况，并 计算皮瓣成活率。 5检测方法及观察指标： 5．1皮瓣大体观察：术后第7d对大鼠皮瓣成活的情况进行肉眼观察。 中文摘要 5．2皮瓣成活率：坏死皮瓣通过观察其外观、颜色及质地等来判断。术后 Plus．v6．0图象 7d，数码相机进行皮瓣摄像后输入计算机，通过Image．Pro 分析系统，计算皮瓣成活率(皮瓣成活面积与总面积之比)。 5．3组织学检查：将石蜡切片进行HE染色，观察组织结构改变。 5．4组织生化检查：依照试剂盒说明书，测定所取皮瓣组织MDA含量及 MPO活性，皮瓣组织中蛋白含量用考马斯亮蓝蛋白定量。 UTHSCSATool Image3．0版，每组选择5张切片，每张切片随机取5个互 不重叠的400倍视野，阳性细胞计数后求其平均数。 6统计学处理：应用SASV8软件对数据进行处理。 结果： 1皮瓣大体观察： 术后7天，非．IR组皮瓣未见坏死，全部成活，皮瓣颜色淡红，弹性 较好，可见少量毛发生长。 丹参．IR组皮瓣近端颜色淡红，由近及远逐渐出现血运不良和坏死， 表现为颜色逐渐变暗，远端呈黑色；质地逐渐变硬，远端坏死区表面形成 痂壳，弹性差；原位掀起皮瓣，可见皮瓣略有出血，肉膜下存在少量炎性 分泌物。 IR组坏死区域明显较丹参一IR组多，可见大部分皮瓣坏死，形成大片 黑色痂壳，弹性极差，残留近端少量未坏死组织，但颜色略暗，血运不良， 原位掀起皮瓣，可见皮瓣出血较