大麦种质资源遗传多样性及贮藏蛋白基因克隆与研究.pdf

摘 要 本文通过对我国大麦地方品种、近缘野生材料的农艺性状考察和蛋白质含量测 定，从中筛选出综合性状好或者具有一个或多个优良性状优异种质46份。采用 子量谷蛋白基因和近缘野生大麦B-hordein基因进行了分离、克隆和测序。主要结果 如下： 艺性状考察和籽粒蛋白质含量测定，结果表明每个性状的变异都较大。生育期138． 22．14％。从中筛选出了46份综合性状好或者具有一个或多个优良性状的优异种 质，为进一步在育种和生产中加以利用提供了理论依据和物质基础。 2、对212份供试材料各考察性状间的相关分析结果表明：有效穗数与穗长，小穗数 与穗粒重呈显著正偏相关，生育期与千粒重呈极显著负偏相关，穗长与穗粒数呈 显著负偏相关，其余性状间偏相关均不显著。表明9个性状虽然具有较复杂的相 关关系，但是产量性状(有效穗数、小穗数、穗粒数、穗粒重、千粒重)以及品 质性状(蛋白质含量)相互之间不存在显著或极显著的负效应，在选择时能够较 好地协调它们之间的关系。 gel 3、利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Acid-polyaerylamide 法检测结果表明，46份供试材料具有丰富的醇溶蛋白等位变异，每份材料均具有 唯一独特的醇溶蛋白带型，共分离出36条相对迁移率不同的谱带，每份材料可电 泳出15～26条，平均19条，有3条带为所有材料共有，即醇溶蛋白带纹的多态 0．737。聚类分析发现，同一类群或者相同地理柬源的材料能够部分地聚成一类或 亚类，表明醇溶蛋白图谱类型与材料的类群和生态地理环境有一定相关性。 4、利用RAPD标记检测结果表明，46份供试材料间遗传差异明显。32个引物共扩 1 Z 供试材料完全区分开，聚类结果与材料的类群和地理来源有一定相关性。 引物共扩增出114条DNA片段，其中96条具有多态性，每个引物可扩增出l—lO 能将所有供试材料完全区分开，聚类结果与材料的类群和地理来源有一定相关性。 料完全区分开。聚类结果与材料的类群和地理来源有一定相关性。 7、RAPD、凡镰仰和ISSR三种标记虽然都能揭示出供试材料间的遗传差异，但各自 所揭示的多态性水平不同。其中，ISSR标记扩增产物的多态性比率(PPB)、平 最大，平均值最小，RAPD标记揭示的遗传相似系数值的范围最小，平均值最大， RAMP标记揭示的遗传相似性系数范围及其平均值居中，表明ISSR标记揭示材 料间的遗传变异最高，其次为RAMP标记，RAPD标记揭示的材料间遗传变异相 对最低。综合而占，三种标记在检测供试材料问的遗传差异和遗传多样性方面， ISSR标记是最佳选择，其次为RAMP标记，RAPD标记相对要差一些。 利用Mantel检测对它们分别揭示的材料间的遗传相似系数矩阵进行了相关分析． 0．0436)。 码区长度分别为924、924和903 的成熟蛋白，且均具有信号肽、富含脯氨酸和谷氨酸的中部重复结构区、N-末端 和C一末端非重复结构区的典型结构。通过与来源于小麦和大麦的已知蛋白质基因 的氨基酸序列比较分析发现，与B型大麦醇溶蛋白基因相比，Htl、肪2和Ht3同 小麦低分子量谷蛋白基因具有更高相似性与一致性。进一步分析揭示，这3个基 因与小麦低分子量谷蛋白基因间系统发育关系更近，聚在同一发育分枝。据此认 为，来自糙稃大麦的3个蛋白质基因属于LMW-m型亚基基因。 bp，相应可编 码297个、312个和322个氨基酸残基的成熟蛋白，且均具有信号肽、富含脯氨 酸和谷氨酸的中部重复结构区和C．末端非重复结构