伯氏疏螺旋体广西分离株外膜蛋白A基因的克隆和序列分析.pdfVIP

维普资讯 广西预防医学 2002年6月第8卷箍 塑 l29 · 论著 · 文章编号 ：1007—158X(2002)03—0129—06 中图分类号：R377 文献标识码 ：A 伯 氏疏螺旋体广西分离株外膜 蛋 白A基因的克隆和序列分析★ 曾 霞 王树声 张 涛 刘 敏 毕胜利 周永东 1广西壮族 自治区疾病预防控制中心(南宁530021) 2 中国预防医学科学院 【摘要】 目的 探求广西伯氏疏螺旋体外膜蛋白A(OSPA)基因变异情况。 方法 应用聚合酶链反 应从 3株广西莱姆病螺旋体 GXLD一4，9，18及 1株贵州分离株长 l4全基因组DNA中将OSPA基因调出， 并克隆到pGEM—TEasyVector载体上，构建重组质粒 ，测序后与国外其它分离株进行同源性比较。 结果 4株莱姆病螺旋体均扩增出约 774bp的OSPA基因，编码258个氨基酸。4者之问核苷酸同源性98．8％～ 99．9％，氨基酸同源性 98％～99％，其中GXLD一4与长 l4同源性最大。与国外分离株 (10MT，Ya501)的同 源性均较高。 结论 莱姆病螺旋体 OSPA基因在广西3个分离株及贵州株长 l4问差异较小 ，但与国外分 离株存在一定差异。 【关键词】 伯 氏疏螺旋体 膜蛋 白 基因 克隆 序列分析 M olecularcloningandDNA sequencingofOSPA geneoffourstrainsBorreliaburgdofferi isolatedinGuangxi．ZENGXia，WANGShusheng，ZHANGTao，eta1．GuangxiCenterforDisease PreventionandControl(Nanning，53oo2J) A【bstract】ObjectiveToinvestigatethevariationofOSPAgeneinGuangxisisolateof Borreliaburgdorferi．M ethodsPCR techniquewasusedtoamphfyhteOSPA genefrom htewhole cellularDNA ofioslateGXID4，9， 18 andChangl4．Themnplified productswere cloned into pGEM-T EasyVetornadseuq enced．Results Th eOSPA genesofhtefourioslateswere 774bpwhich encode258aminoacids．Th enucleotidenadaminoacidsequence homologyamonghtefourstrains was 98．8～99．9％ and98～99％ respectively．Ithad99．9％ nucletidenad99％ amimoacid sequencehomologybetween GXI_D-4nadChnagl4．Th efourstrainshadhighersequencehomology htanhtatofwtoforeignioslates(Ya501．1OMT)．Conclusion TheOSPAgenesofhtefourioslates revealde apronouncde homogeneity，butvariationsarenotedwhencomparedwiht foreing ioslates ． K【eywords】 Borreliaburgdorferi Membraneprotein Gene Cloning Sequencenaalysis 莱姆病螺旋体外膜蛋 白A(OSPA)存在于 螺旋体等交叉反应性较低，提示其在诊断中 90％的莱姆病螺旋体株 “。，人感染莱姆病螺 具有一定应用价值 0。同时OSPA具有 良好