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基因工程及其应用 第2节 能发光的水母 能否能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 能产生人胰岛素的大肠杆菌 一、基因工程(gene engineering) 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 原理 操作环境 操作水平 结果 基因重组 生物体外 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 1、 基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶 专一性: 识别特定核苷酸 序列,在特定的切点切DNA, 具特异性。并裂解磷酸二酯 键,产生两个黏性末端。 二、基因操作的工具 黏性末端 例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别 GAATTC序列,并在G和A之间切开。 EcoRⅠ 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: 2、基因的“针线” ——DNA连接酶 连接酶的作用: 将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 连接的部位: 生成磷酸二酯键 DNA连接酶的作用过程: 基因的针线:DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 3、基因的运输工具——运载体 常用的运载体: 质粒、噬菌体和动植物病毒等 标记基因,便于进行检测。 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子. 作为运载体必须具备哪些条件? 1)能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2)具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。 3)具有某些标记基因,便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 三、基因工程的操作步骤 从细胞中分离出DNA 从大肠杆菌中提取质粒 限制 酶 提取目的基因 限制酶 目的基因与运载体结合 DNA连 接酶 目的基因导入受体细胞 目的基因的表达与检测 基因工程操作的基本步骤 转基因抗虫棉花 转入苏云金杆菌的一个抗虫基因,是中国目前最主要的转基因作物 1、基因工程与作物育种 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 不会引起过敏的转基因大豆 运用基因工程技术,不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽新品种,还可以培养出具有特殊用途的动、植物。 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国) 导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠 超级动物 特殊动物 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 ⑴ 基因工程药品的生产 许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。 微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。 2、基因工程在医学上的应用 胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。 将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%! 通过基因工程的方式创造了能合成人干扰素的大肠杆菌,每1Kg的培养液可提取20—40mg干扰素。 干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”!过去从人血中提取,300L血才提取1mg!其“珍贵”程度自不用多说。 ⑵ 基因诊断与基因治疗 诊断:用放射性同位素等标记的“DNA探针”检测肝炎病毒等病毒感染及遗传缺陷,不但准确而且迅速。 我国研究人员正在制备用于基因治疗的基因工程细胞 治疗:把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达到治疗疾病的目的。 ⑴ 环境监测: 基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。 1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来 3、基因工程与环境保护 利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。 ⑵ 环境污染治理: 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类
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