精品生物必修3详讲.doc

【专题分系统】 1.1　DNA重组技术的基本工具 DNA重组技术的基本工具 限制性核酸内切酶―“分子手术刀” 来源 主要从原核生物中分离纯化出来。 种类 已从近300种不同的微生物中分离出约4000种限制酶。 作 ? 用 内容及 特点 识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列（大多数识别序列由6个核苷酸组成，如EcoRI、SmaI；也有少数识别序列由4、5或8个核苷酸组成），并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，参见教材图1-2，即具有特异性。 结果 切割产生的DNA片段末端通常有两种形式（参见教材图1-3）： ①黏性末端：在识别序列中轴线两侧切开 ②平末端：在识别序列中心轴线处切开 DNA连接酶―“分子缝合针” 作用 将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 种类 种类 来源 作用 E·coliDNA连接酶 大肠杆菌 只能连接互补的黏性末端。 T4DNA连接酶 T4噬菌体 连接互补的黏性末端和平末端（效率低）。 基因进入受体细胞的载体―“分子运输车” 举例 质粒 （常用） 概念 是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体（即拟核DNA）之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 特点 ●具有一个至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入其中； ●可在受体细胞中自我复制或