镧和铈对两种细菌生长的影响及胞内DNA的荧光光谱分析.pdfVIP

第33卷 ，第7期 光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vo1．33，No．7，pp1829—1833 2013年 7月 SpectroscopyandSpectralAnalysis July，2013 镧和铈对两种细菌生长的影响及胞 内DNA的荧光光谱分析 柴瑞娟 ，王玉良 1．安徽工程大学生物与化学工程学院，安徽 芜湖 241000 2．安徽科技学院生命科学学院，安徽凤阳 233100 摘 要 为了研究镧，铈对细菌生长及核酸的影响，用光电比浊法测定了镧，铈和钙调蛋白抑制剂(氯丙嗪) 存在时两种细菌的生长曲线，并用荧光光谱法研究了镧，铈对小牛胸腺DNA和细菌胞内DNA结构的影响。 结果显示适当浓度 (200mg·L )稀土元素可以促进细菌的生长和繁殖，比对照提前进入对数期，扫描电镜 观察也显示镧，铈可以促进枯草芽孢杆菌个体的生长，菌体体积比对照更大，但促进繁殖的作用会被氯丙嗪 抑制，表明镧，铈促进细菌生长的机理可能与钙调蛋白的功能有关；荧光光谱分析显示镧，铈会使小牛胸腺 DNA荧光增强，镧、铈浓度分别为5和 10mg·L 时荧光增强作用最大；但镧使细菌胞内DNA荧光猝灭， 铈使其荧光增强，结论认为镧，铈对核酸的影响远比想象的要复杂。 关键词 细菌 ；稀土元素；生长；核酸 ；荧光光谱分析 中图分类号：O614．1 文献标识码：A IIOI：10．3964~．issr~1000—0593(2013J07—1829～05 业上安全高效的施用提供帮助。 引 言 1 实验部分 遗传物质对物种的生存，生态环境的安全有极其重要的 意义，因此人们很重视化合物对 DNA的作用。研究化合物 1．1 试剂与仪器 ． 对DNA结构的影响主要采用荧光光谱分析法L】]。荧光光谱 水合硝酸镧，水合硝酸铈，氯化钠，无水乙醇，Tris，盐 分析法是分子发光分析方法，分子在室温时基本都处于电子 酸 ，均为分析纯(AR)；牛肉膏，蛋白胨 ，生化试剂 (BR)，国 能级的基态，当吸收紫外或可见光后 ，基态分子中的电子会 药集团化学试剂有限公司生产；小牛胸腺 DNA(Sigma)； 跃迁到激发单线态的各个不同振动一转动能级。处于激发态 DNA提取试剂盒 (Sigma)。 的分子由于能级高而不稳定，可以通过辐射跃迁和无辐射跃 全 自动不锈钢双层立式电热压力蒸汽消毒器 (YX4OO111， 迁等分子内的去活化过程返回到基态而释放多余的能量，发 上海锐安自动化仪表有限公司)；超净工作 台(sw-cJ一1FD， 射荧光是其中的一条途径。荧光与分子结构有紧密关系，共 上海玺恒实业有限公司)；恒温恒湿振荡培养箱(BS-4G，常 轭效应，刚性结构，共平面效应和取代基效应都能引起物质 州国华电器有限公司)；超速离心机 (Simga3K15)；紫外一可 荧光强度的改变2【j。 见分光光度计 (UV-3600，日本岛津)；荧光分光光度计 (RF- 研究稀土元素的生物学作用大都采用稀土配合物_3]，其 5301PC，日本岛津)；扫描电子显微镜(8-4800，日本 日立)。 中在体外以真核生物小牛胸腺 DNA为材料_4]的研究为探讨 1．2 材料 稀土元素对核酸的影响起到了很好的参照作用。但由于细胞 枯草芽孢杆菌 ：Bacillussubtilis(B．subtilis)；大肠杆 内外环境的差别很大，稀土元素对胞内DNA的影响更复杂， 菌 ：Escherichiacoli(E．coli)，中国科学院微生物研究所菌 本研究与前人研究最大的区别