黄粉虫纤溶活性蛋白酶（TFP）酶学性质以及红外光谱分析.pdfVIP

LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL．22NO．9 时珍国医国药2011年第22卷第9期 ◇药理药化◇ 黄粉虫纤溶活性蛋白酶 (TFP) 酶学性质 以及红外光谱分析 吴艳玲 ，谭竹钧 ，韩雅莉，林非凡，陈雅雄，余 磊 ，汪 威 ，张 丽 (广东工业大学轻工化工学院，广东 广州 510006) 摘要 ：目的研究黄粉虫纤溶活性蛋白(TenebrioFibrinolyricProteins，TFP)的酶学性质及对其进行分类。方法 以BAEE、 BAPNA和酪蛋 白为底物分别测TFP的Km值 ；分别研究PMSF和胰蛋 白酶对 TFP活性的影响。结果 以BAEE和BAPNA 为TFP底物，Km值分别为0．182mmo~L和 1．138mmo~L，表明TFP与BAEE亲和力最好，酯酶活力酰胺酶活力肽 键酶活力。丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF能有效抑制TFP活性，而偏弱碱性环境下胰蛋 白酶未降解TFP，胰蛋白酶与TFP 红外结构图谱相似，可以初步证明TFP属于丝氨酸蛋白酶。结论 黄粉 虫纤溶活性蛋 白酶的酯酶活力最好，属于丝氨酸 蛋 白酶。 关键词 ：黄粉虫纤溶活性蛋白；Km； 丝氨酸蛋白酶； 胰蛋白酶；红外光谱 DOI标识 ：doi：10．3969／j．iSSH．1008-0805．2011．09．001 中图分类号：0629 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2011)09-2061-03 Infrared SpectralAnalysisand EnzymologicalCharacteristic ofTenebrio Fibrinolyric Proteins(TFP) wuYan-ling，TANZhu~un ，HANYa-li，LINFei-fan，CHENYa—xiong，YULei，WANGWei，ZHANGLi (BioengineeringDepartment，FacultyofLigh’tandChemicalIndustry，GuangdongUniversityofTechnology， Guangzhou5l0006．China) Abstract：ObjectiveTostudyenzymologicalcharacteristicofTenebrioFibrinolyricProteins(TFP)andtodetermineitsenzymo- logicalclassification．M ethodsTheKm ofTFPwasdetectedbyusingBAEE，BAPNA andthecaseinassubstrate，andtheeffects ofPMSFandtrypsinonfibrinolyticactivityofTFPwerestudied．Results TheKm ofTFPwere0．182mmol／Land1．138mmol／ LdetectedseparatelybyusingBAEEandBAPNAassubstrate，anditshowedthatTFPhadthestrongestaffinitytoBAEE— ester— aseactivityActivityofnon—peptidebondamidePeptidaseactivity．ThefibrinolyticactivityofTFPcouldbeinhibitedeffective— lvbvPMSF．theinhibitorofserineproteinase．WhileTFPwasntdecomposedbythetrypsininthesimulationoftheleaningweak basicity．TheinfraredchartdemonstratedthattrypsinandTFP hadsimilarstructure ，sothesynthesisabovemightproveinitially thatTFP belongedtotheserineproteinaseassameasthetrypsin．Conclusion TFPhasthebestesteraseactivit