通心络对自发性糖尿病大鼠心肌组织胶原网络重构的影响.pdfVIP

· 198 · 中国中医药科技2010年5月第 17卷第3期 May2010Vo1．17No．3 通心络对 自发性糖尿病大鼠心肌 组织胶原网络重构的影响* 徐向东 李 晓 姜 萍 魏 芹 林海清 。山东中医药大学附属医院 ·济南250011 山东省莱芜市中医院 ·莱芜271100 摘 要 目的：观察通心络对 自发性糖尿病 GK 大鼠心肌工型和Ⅲ型胶原阳性表达及含量、细胞转化生 长因子 TGF一＆ 含量的影响。方法：4月龄GK大鼠30只，随机分为GK对照组、通心络大、小剂量组，另 取4月龄 Wistar大鼠lO只作正常对照，分别灌胃12周。灌胃结束后，制备心肌切片，免疫组化染色，计算 胶原I、胶原Ⅲ阳性面密度比值以代表表达程度；取心肌匀浆，酶联免疫方法测定心肌 I、Ⅲ型胶原及TGF — 含量。结果：与同月龄正常大鼠相比较，GK大鼠血糖明显增高 P 0．O1 ，通心络药物组有降低趋 势，但无差异 P 0．o5 。与正常大鼠比较，GK大鼠心肌胶原I阳性面密度比值明显增高 P 0．O1 ，胶 原Ⅲ阳性面密度比值明显降低 P O．01 ，心肌匀浆胶原I含量明显增高 P 0．O1 ，胶原Ⅲ含量降低 P 0．o5 ，心肌胶原 I／Ⅲ比值明显增高 P 0．O1 ，TGF一岛含量降低 P 0．O1 ；与7月龄GK大鼠比较， 通心络组胶原I阳性面密度明显降低 P 0．O1 ，高、低剂量组之间有差异 P 0．o5 ，胶原Ⅲ阳性面密度 明显升高 P 0．01 ；胶原 I含量明显降低 P 0．O1 ，胶原Ⅲ含量明显提高 P 0．O1 ，胶原 I／Ⅲ比值 降低 P 0．01 ，TGF一陆含量明显提高 P 0．01 ，高、低剂量组之间无差异 P O．o5 。结论：通心络可 降低GK大鼠心肌胶原I阳性表达，I型胶原含量，升高胶原Ⅲ阳性表达，Ⅲ型胶原含量，降低胶原I／Ⅲ 比值，升高TGF一岛含量，具有改善心肌间质网络重构作用。 主题词 糖尿病，中医药疗法 通心络，治疗应用 大鼠 心肌间质网络主要是由I型和Ⅲ型胶原纤维 Collagen TECHNOI_~YINC，sc一59772，Lot．J1907；小鼠抗大鼠Ⅲ型胶 type工、Collagentypell1 组成，心肌胶原网络重构、心肌间质 原：英国Abcam公司，ab6310—100，Lot：353169；二抗 ：羊抗小 纤维化可导致氧的弥散距离增加，使心肌处于缺血缺氧状 鼠．11】 广谱、加强型 ：上海长岛生物技术有限公司；DAB 态，是糖尿病心肌病左心室舒张和收缩功能障碍的主要原因 显色。 之一…，在外界刺激下，容易发作冠脉痉挛。 RatCollagentypeIELISA试剂盒：美国a,,piaBio实验室， 通心络具有益气通络、解痉止痛等作用 ，实验研究证实 CatNo．3B942，LotNo．1座机电话号码；RatCO~ lltypelllELISA试剂 其具有抗心肌纤维化作用 J。中医理论认为，络脉可渗灌血 盒 ：美国RapidBio实验室，CatNo．3B944，LotNo．1座机电话号码；Rat 气，濡养脏腑，从中西医结合观点分析 ，心肌间质纤维化导致 TGF一13, 试剂盒 ：美国RDSystemsInc，CatNo．SXR044 的心肌缺血缺氧有可能是心络损伤导致不能渗灌血气的病 LotNO．0701121。 理基础之一，本研究主要观察通心络对 自发性糖尿病 GK 匀浆机：IKA—ULTRA一llJRRAXT25basic；ELx808酶标 大鼠心肌 I型和Ⅲ型胶原阳性表达及含量、细胞转化因子 仪：美国BIO—TEKINSlltU]VIEN~，INC；DDL一5低温冷冻离 TCl~一晶 的影响。 心机：上海安亭科学仪器厂。ttPIAS一1000高清晰度彩色病 1 材料与方法 理图文分析系统 ：同济医科大学千屏影像工程公司。 1．1 动物 GK大鼠30只，中国科学院上海实验动物中心， 1．3 分组及给药 CK大鼠3o只，随机分为3组：通心络大 批号：0005569，4～4．5月龄。雄性，体重230～310g。普通级 剂量组、通心络小剂量组、GK模型对照组；取 4月龄 Wistar Wistar大鼠1O只，4月龄，雄性，体重380～450g，山东大学新 大鼠1O只作为正常大鼠对照组。正常对照组：1O只，2ml生 药评价中心提供，动物合格证号2OO2O3。 理盐水。GK模型对照组：1O只，2ml生理盐水。通心络高剂 1．2 药品及试剂、仪器 量组 ：10只，通心络3．6g／l,g灌胃；通心络低剂量组 ：10只，通 通心络胶囊内超微粉：石家庄以岭药物公司提供，按 心络 1．8Icg灌胃；均每天 1次，灌 胃l2周。因动物灌 胃等 照通心络