基因操作上下游技术大实验.docVIP

 基因操作上下游技术大实验 Gene Manipulation Technology Experiment in up downstream 课程基本信息 学时: 60 学分: 2.0 考核方式：考查(实验中的平时成绩占30%,实验报告成绩占70%) 中文简介：广义的基因工程定义为DNA重组技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是外源基因重组、克隆、表达的设计与构建，下游技术则涉及含有重组基因的生物细胞（生物工程菌或细胞）的大规模培养以及外源基因表达产物的分离纯化过程。上游DNA重组的设计必须以简化下游操作工艺和装备为指导思想，而下游过程则是上游基因重组蓝图的体现与保证。基因工程技术的核心内容之一基因操作技术，基因操作技术的关键环节包括目的基因的DNA片断与载体的连接（也称为重组DNA分子），重组载体转化到宿主细胞中，载体在宿主细胞内大量繁殖，同时重组体DNA拷贝也转移到子细胞中，随着载体进一步复制，重组体所携带的目的基因就被克隆了。由于分子生物学和基因工程技术的快速发展，对基因工程技术的理论和实践在各个层面上均产生了巨大的推进和影响作用。 本实验课程是与基因工程、基因工程下游技术专业课的理论课程相关的实验操作内容，该课程作为一门独立开设的必修课，需要以基因克隆技术的理论内容为基础，其教学目的是为培养学生分析问题和解决问题的能力，提高学生在基因操作方面的动手能力，通过实验，要求学生能在原有的相关理论知识基础上，掌握植物DNA提取方法和质粒DNA的提取DNA酶切、片段回收及重组连接、感受态细胞制备、重组基因转化的关键技术。该课程在的教授对象是生物科学专业（生物安全与检验检疫）本科生，本专业是一个多学科交叉、宽口径设置的新专业。该课程在该专业的人才培养体系中占有很重要的地位，为了培养学生具备扎实的动植物检验检疫专业基础理论，具有分析检测技术和综合执法政策水平，具备动植物检验检疫工作实际技术操作和执法水平的能力。该课程是生物科学专业专学生学完了相关专业基础课进行教学的一门实验技术必修课，是对生物科学专业（生物安全与检验检疫）本科生的专业操作技术和专业工作能力的综合性实操训练。 二、 教学目的与要求 基因操作上下游技术大实验作为一门独立开设的必修课，是在学生修完相关的专业基础课之后进行的，要求学生具备基因工程、分子生物学、植物学、遗传学、和生物化学的基本理论知识的实验技能。该课程作为生物科学专业（生物安全与检验检疫）本科生的主干实验技术课，是该专业学生必需的技术基础和实验技能要求。通过本课程的教学，使生物技术专业在课程结构上把专业基础课、专业课和应用性技术课程有机地联系在一起，使学生对生物技术的全貌有一个更新的认识，为学生的毕业实习和毕业论文奠定必要的技术、技能和专业基础。 本实验课在方法上，力求经典，内容涵盖基因工程中的基因上下游操作的基本过程，整个实验基本上是一个连续的过程，通过学习，要求学生能在原有的相关理论知识基础上，较全面和深入理解基因工程原理、基本掌握生物技术技术中常用的实验方法，以求为以后的学习和科研工作打下良好和扎实的基础。 要求学生达到的实验标准及实验能力： 1. 理解并掌握基因工程的技术学习利用T－载体对载体PCR产物进行连接构建表达载体的方法学习利用进行大肠杆菌的遗传转化实验一 基因组DNA提取 基因组DNA提取 8 实验质粒DNA的提取 掌握质粒DNA的提取检测 实验 掌握基因组DNA质粒DNA 8 实验 掌握 8 实验DNA酶切、片段回收及重组连接 掌握双酶切策略及酶连接反应条件 8 实验筛选 掌握化和蓝白斑筛选 10 实验在，根据需要内容的顺序进行调整。指导书 2.钟卫鸿主编.基因工程技术试验指导.北京：化学工业出版社.2007年 3.朱旭芬编著.基因工程实验指导.北京: 高等教育出版社. 2010 4.刘志国主编.基因工程原理与技术. 北京: 化学工业出版社. 2011 5.张虎成主编. 基因操作技术. 北京: 化学工业出版社. 2010　　　　　 PCR理论理论与技术