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基英肽对肿瘤患者淋巴细胞免疫功能的影响.doc
基英肽对肿瘤患者淋巴细胞免疫功能的影响
摘要:应用3H-TdR及14C-UR参入淋巴细胞的双标记方法,观察了淋巴细胞转化试验中细胞DNA及RNA的合成功能。结果表明,肿瘤患者在基英肽治疗前淋巴细胞的参入计数显著低于正常人,治疗后显著高于治疗前,但仍低于正常人。
关键词:基英肽;淋巴细胞转化;双标记3H-TdR及14C-UR 。
基英肽是甲型链球菌(Alphahemolytic streptococci)经发酵提炼的一种多糖类物质,具有提高机体免疫功能和抗瘤作用[2.3],体外培养证明对癌细胞有明显的抑制作用[4],为了观察基英肽治疗肿瘤前、后患者淋巴细胞免疫功能的状况,我们应用3H-TdR及14C-UR参入淋巴细胞,观察基英肽在培养中的淋巴细胞DNA的合成能力,以了解淋巴细胞的免疫功能状态及在肿瘤治疗中的重要意义。
【材料和方法】
1、研究对象:正常对照44例,为健康献血员;肿瘤病人23例(胃癌6例、食管癌7例,绒癌10例)。基英肽治疗剂量为5mg,肌肉注射,每天1次,10d为1疗程。
2、试剂及仪器,3H-TdR(上海研究所,活度8.14GBq/mM)。14C-UR(中国医学院放射医学研究所,活度1.961GBq);Tc-199(Sigma);LS-9000型双道液闪测量仪(Beckman)
3、方法:按常规无菌操作,静脉采血2ml,肝素抗疑。取抗疑血0.2ml,加入有2mlTC-199(浓度1.1%,PH7.2-7.4)营养液的培养瓶,再加入PHAμg100/0.1ml(N.S),37℃孵箱静置培养72h,终止培养前6h,每瓶加3H-TdR18.5KBq及14C-UR7.4KBq。终止培养后每瓶加冷生理盐水2ml,将细胞悬液移入离心管中,以100r/min离心5min,弃去上清液,冷生理盐水2ml洗涤细胞沉淀,以2000r/min离心10min,进行3次,所得细胞沉淀加1mol/LnoH0.5ml,沸水浴消化,双氧水脱色后,取100μl消化液于测量瓶内,加二氧六环闪烁液5ml(内含PP0.05%, POP0P0.05%,乙二醇乙醚16.7%V/V,荼5%),用LS-9000型液闪计数仪进行3H及14C双标记样品测量dpm值。
结果表明:肿瘤病人经过基英肽治疗后,白细胞总数和淋巴细胞数量均有升高,相差显著。治疗前组和正常组比较,相差非常显著(表2)。在淋巴细胞转化试验中,3H-TdR及14C-UR的参入计数在基英肽治疗后明显增加,治疗前后比较相差显著,反映出细胞免疫功能明显改善,治疗后与正常组比较相差不显著(表1)。肿瘤病人治疗前3H-TdR及14C-UR的参入计数明显低于正常组,表明肿瘤病人的细胞免疫功能低于正常人。经过基英肽治疗后淋巴细胞的数量均得到提高,与有关报道相近。
DNA合成是细胞分裂繁殖的物质基础,RNA以DNA为模板转录合成。本文证明肿瘤病人的淋巴细胞DNA及RNA合成功能明显低于正常人,在应用基英肽治疗后,细胞免疫功能迅速改善,3H及14C的参入主数明显高于治疗前,表明基英肽治疗肿瘤病人后可改善和调节淋巴细胞免疫功能,在正常情况下淋巴细胞对肿瘤有杀伤作用,当细胞免疫功能降低至不能抑制肿瘤细胞突变时,可能发生癌变。测定肿瘤病人淋巴细胞免疫功能,对估计机体免疫功能、评价疗效等均有重要意义。
基英肽具有多种治疗作用,能改善机体免疫功能,促进淋巴细胞转化;对抗免疫抑制剂的免疫抑制作用;能提高巨噬细胞的吞噬功能;可抑制培养的瘤细胞生长,提高荷瘤机体的白细胞免疫功能。
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