多倍体技术在水产动物育种中应用.docVIP

多倍体技术在水产动物育种中的应用 摘 要 多倍体是指生物体的体细胞中含有超过2个染色体组的个体。多倍体育种是通过增加染色体组的方法来改造生物的遗传基础，从而培育出符合需要的优良品种。相对于同种的二倍体，多倍体具有个体大、产量高、抗病力强等特点。多倍体诱导及其特性研究是水产养殖研究领域的一个热点，目前在鱼类、贝类等水产动物的育种中已经取得了一定的成就，具有广阔的发展前景。本文主要介绍多倍体育种的基本原理和方法，以及在几种水产动物育种中的应用。 关键词 多倍体；育种；水产动物；应用前景 1.多倍体产生的基本原理 多倍体是由于细胞内染色体加倍而形成的，即通过卵子第二极体的保留或受精卵早期有丝分裂的抑制而实现。 对于二倍体动物，成熟卵处于第二次成熟分裂中期，当具有一组染色体的精子入卵后，刺激卵子继续完成第二次分裂，卵中原有的二组染色体中一组作为第二极体排出，受精卵成为正常的二倍体。如果在精子入卵时，第二极体不能正常排出，则精卵原核结合成为三倍体受精卵。如果卵子受精后正常排出第二极体，并与单倍体精子结合形成二倍体受精卵，而受精卵的第一次卵裂受到抑制，则产生四倍体。 2.人工诱导多倍体的方法 人工诱导多倍体的方法主要有物理学、化学和生物学三种。 2.1物理学方法 2.1.1.温度休克法 温度休克法包括冷休克法(0- 5℃)和热休克法(30℃左右)两种，即用略高于或略低于致死温度的冷休克或热休克来诱导三倍体或四倍体的方法。进行温度处理最重要的必须确定处理的开始时间、持续时间以及温度高低。如果阻止第二极体外排，应该在受精后马上进行处理。如果抑制第一次卵裂，应该在第一次有丝分裂中期进行处理。 2.1.2静水压法 静水压法就是利用水压机产生较高的静水压来抑制第二极体的放出或第一次卵裂而产生多倍体。它是进行鱼类染色体组操作的有效方法，休克的最佳条件易于掌握，处理程序易于标准化。 静水压法的优点在于：①诱导率较高，一般能达到90%以上。②处理时间短，一般为3-5分钟。③对受精卵的损伤小，成活率高。 2.1.3 电休克法 贾方钧(2001)电休克法诱导多倍体的最佳条件为：受精卵分别在非电解质的甘露糖溶液和电解质的含5％小牛血清的细胞培养液中接受电激，细胞的融合效率差别不大，但融合后胚胎发育成活率有明显差别，细胞在非电解质溶液中损伤较小，得到的多倍体后代成活率高。 由于电休克法是近年来才开始采用的多倍体诱导方法，目前还没有很多研究与成熟工艺，故尚未被广泛采用。 2.2化学方法 应用某些化学药品，在适当的时候处理水产动物受精卵，可以抑制第二极体的排出或抑制第一次有丝分裂，从而达到产生三倍体或四倍体的目的。例如，细胞松驰素 B 通过影响纺锤丝内微管的形成，抑制减数分裂或有丝分裂纺锤体的正常收缩，使细胞分裂受阻，在贝类的多倍体诱导中应用较多。诱导多倍体的其它化学试剂有聚乙二醇(PEG)、6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)、咖啡因、N2O和CHClF2 等麻醉剂。 2.3生物学方法 人工诱导的生物学方法主要是异源精子通过远缘杂交诱发受精卵产生多倍体。除此之外，还有核移植和细胞融合两种方法。 核移植是指应用显微操作技术，将某一特定细胞的核转移和嵌入到另一细胞中的过程是在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。.鱼类人工多倍体育种的研究进展.现代生物医学进展,2008，8(9）：1778-1779 【2】朱传忠,邹桂伟.鱼类多倍体育种技术及其在水产养殖中的应用.淡水渔业,2004， 34(3）：53-56 【3】童芳,孙军,林小涛.鱼类多倍体育种及其在养殖中的应用.海洋与渔业，2006(5）：18-19 【4】 4