第四章：微生物工程的发酵技术.ppt

第一节 微生物工程的发酵类型 ★1固态发酵的一般过程 第二节 微生物工程发酵的一般过程 二、发酵技术 按照发酵方式可以分为： 分批发酵 补料-分批发酵（半连续发酵） 连续发酵 高浓度发酵 混合发酵 1、分批发酵（batch fermentation） （1）基本概念 分批发酵又称为分批培养，是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后，接入少量的微生物菌种进行培养，使微生物生长繁殖，在特定的条件下只完成一个生长周期的发酵方法（微生物培养方法）。 也指在发酵过程中，除了不断进行通气（好氧发酵）和为调节发酵液的 pH 而加入酸碱溶液外，与外界没有其它物料交换的一种发酵方式。培养基的量一次性加入，产品一次性收获，是目前广泛采用的一种发酵方式。 ★有空罐时期 （3）分批发酵的优缺点 2、补料--分批发酵（fed-batch fermentation） （1）基本概念 补料分批发酵，又称“流加发酵”，是指在微生物分批发酵过程中，以某种方式向发酵系统中补加一定物料，但并不连续地向外放出发酵液的发酵技术，是介于分批发酵和连续发酵之间的一种发酵技术。 补料-分批发酵可以克服由于养分的不足而导致发酵过早结束的弊端，是分批发酵的发展，又称流加-分批发酵。该过程中物料的浓度一直维持在较低的恒定水平。 （2）半连续发酵 在补料-分批发酵的基础上加上间歇放掉部分发酵液（行业中称为带放）就是半连续发酵。 带放是指放掉的发酵液和其他正常放罐的发酵液一起送去提炼工段的操作。 （3）补料--分批发酵的优点 缺点： ①放掉发酵液的同时也丢失了未利用的养分和处于生产旺盛期的菌体； ②定期补充和带放使发酵液稀释，送去提炼的发酵液体积更大； ③一些经代谢产生的前体可能丢失。 3、连续发酵（continuous fermentation） （1）概念 是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基，同时以相同速度流出培养液（发酵液），从而使发酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。 （2）分类 单级（罐）连续发酵 多级（罐）连续发酵 （3）单级连续发酵 装置： 如果在反应器中进行充分的搅拌，则培养液中各处的组成相同，且与流出液的组成一样，成为一个连续流动搅拌罐式反应器（continuous stirred tank reactor ，CSTR）。 连续发酵的控制方式有两种： 一种为恒浊器（turbidostat）法，即利用浊度来检测细胞的浓度，通过自控仪表调节输人料液的流量，以控制培养液中的菌体浓度达到恒定值； 另一种为恒化器（chemostat）法，它与前者的相似之处是维持一定的体积，不同之处是菌体浓度不是直接控制的，而是通过恒定输入的养料中某一种生长限制基质的浓度来控制。 优缺点： 在单罐连续发酵中，由于发酵液在不断搅拌，一部分刚流入的发酵基将随发酵液一起流出。 优点是： ① 设备的体积可以减小； ② 操作时间短，总的操作管理方便，便于自动化控制； ③ 产物稳定，人力物力节省，生产费用低。 缺点是： ① 对设备的合理性和加料设备的精确性要求甚高； ② 营养成分的利用较分批发酵差，产物浓度比分批发酵低； ③ 杂菌污染的机会较多，菌种易因变异而发生退化。 （4）多级连续发酵 多级恒化器最常见的是增加罐的级数和将菌体送回罐内 。 多级恒化器的优点是在不同级的罐内存在不同的条件。这有利于多种碳源的利用和次级代谢物的生产。 例如采用葡萄糖和麦芽糖混合碳源培养产气克雷伯氏菌，在第一级罐内只利用葡萄糖，在第二级罐内利用麦芽糖，菌的生长速率远比第一级小，同时形成次级代谢产物。由于多级连续发酵系统比较复杂，用于研究工作和生产实际有较大的困难。 （5）连续发酵的优缺点（与分批发酵相比 ）? ? ?优点：①可以维持稳定的操作条件，有利于微生物的生长代谢，从而使产率和产品质量也相应保持稳定； ②能够更有效地实现机械化和自动化，降低劳动强度，减少操作人员与病原微生物和毒性产物接触的机会； ③减少设备清洗。准备和灭菌等非生产占用时间，提高设备利用率，节省劳动力和工时； ④由于灭菌次数减少，使测量仪器探头的寿命得以延长； ⑤容易对过程进行优化，有效地提高发酵产率。 缺点： ①由于是开放系统，加上发酵周期长