支扩宁合剂对人支气管上皮细胞肿瘤坏死因子-α表达影响的体外研究_药学论文.docVIP

支扩宁合剂对人支气管上皮细胞肿瘤坏死因子-α表达影响的体外研究_药学论文 支扩宁合剂对人支气管上皮细胞肿瘤坏死因子-α表达影响的体外研究_药学论文 作者：吴其标，曹世宏，卢金福，达庆国，孙子凯 【摘要】 　　目的探讨肿瘤坏死因子（TNF-α）在支气管扩张症发病机制中的作用及支扩宁合剂的疗效机理。方法应用支气管扩张症患者痰液刺激分组体外培养的人支气管上皮细胞，检测、分析各组细胞TNF-α表达水平及中药支扩宁合剂的干预效果。结果在支气管扩张症患者的痰液刺激下，支气管上皮细胞TNF-α表达活化；中药支扩宁合剂可抑制支气管上皮细胞TNF-α的表达。结论支气管上皮细胞TNF-α表达在支气管扩张症发病中可能起到重要的作用；中药支扩宁合剂可抑制支气管上皮细胞TNF-α的表达，从而抑制支气管扩张症气道炎症反应，这可能是其疗效机理之一。 【关键词】 支扩宁合剂 支气管扩张症 支气管上皮细胞 肿瘤坏死因子-α 　　Abstract：ObjectiveTo explore the role of TNF-α in the pathogenesis of bronchiectasis and the mechanism of therapeutical effiect of Zhikuoning Mixture on bronchiectasis.MethodsIn vitro cultured Human Bronchial Epithelial Cells(HBE) were divided into groups and stimulated by sputa from bronchiectatic patients.The expression of TNF-α in HBE and the effect of Zhikuoning Mixture on it were assessed. ResultsThe expression of TNF-α in HBE was activated by sputa from bronchiectatic patients and Zhikuoning Mixture might suppress the expression. ConclusionThe expression of TNF-α in HBE plays an important role in the pathogenesis of bronchiectasis; Zhikuoning Mixture can suppress the TNF-α expression in HBE so as to improve airway inflammation in bronchiectasis. This may be one of mechanisms of therapeutic effect of Zhikuoning Mixture on bronchiectasis. 　　Key words：Zhikuoning mixture; Bronchiectasis; Human bronchial epithelial cells; TNF-α 　　慢性炎症持续进展导致支气管树及其周围肺实质破坏，是发生支气管扩张症（简称支扩）及其相关症状的一个主要原因。肿瘤坏死因子-α（TNF-α）具有广泛生物学功能，在支扩发病中发挥着重要的作用［1］。 本实验从体外研究角度，探讨了TNF-α在支扩发病中的作用及中药支扩宁合剂的干预效应。报道如下。 　　1 材料与仪器 　　1.1 人支气管上皮细胞株HBE 4-E6/E7-C1（以下简称HBE），购于American Type Culture Collection USA，产品编号CRL- 2079，F-11778，上海晶赛生物工程有限公司代购。 　　1.2 培养基含 　　20% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基。 　　1.3 药物 　　1.3.1 支扩宁合剂 　　500 ml(0.7 g/ml)，为中药复方制剂，由南京中医药大学附院制剂室提供。处方：黄芩 10 g，桑白皮 10 g，杏仁 10 g，枳壳 10 g，郁金 10 g，南沙参 10 g，麦冬 10 g，薏苡仁 15 g，冬瓜仁 15 g，全瓜蒌 15 g，黛蛤散 15 g，丹参 15 g，白茅根 30 g，等。分别按终浓度 7×10-3，7×10-4，7×10-5 g/ml 稀释备用。 　　1.3.2 红霉素 　　0.3g/支，大连美罗大药厂生产，批号根据文献［2］，按终浓度 5 μg/ml 计算，用培养基稀释成 25 μg/ml 备用。 　　1.4 刺激物 　　取自支气管扩张症急性感染期患者。患者为首次