毛细管区带电泳分离和检测利多卡因方法的研究_医学论文.docVIP

毛细管区带电泳分离和检测利多卡因方法的研究_医学论文 毛细管区带电泳分离和检测利多卡因方法的研究_医学论文 作者；马汉祥，刘 红，吕 淞，高改莉，施伟忠，李 锋 【摘要】 目的 建立毛细管电泳分离和检测利多卡因的方法。方法 毛细管区带电泳分离利多卡因，电泳分离条件：30mmol/L NaH2PO4-H3PO4（pH=5.0）缓冲液。先采用压力（20psi）进水5s，随后电动进样（8kV，5s），检测波长200nm，运行电压30kV，温度20℃，运行时间5min。结果 在0.1～12.5μg/ml范围内呈良好的线性关系和重现性（R2=0.9998，n=5），回收率96.80%～105.8%，日内及日间精密度(RSD)均小于6%。方法的检测限10ng/ml。结论 本方法简便、快速、灵敏，为利多卡因的定量测定提供了新的、更为理想的方法学手段。 【关键词】 毛细管区带电泳；分离；利多卡因 【Abstract】 Objective To establish capillary zone electrophoresis method for the determination and separation of lidocaine.Methods Determination and separation of lidocaine by capillary zone electrophoresis (CZE) and electrophoresis conditions were as following：buffer was 30mmol/L NaH2PO4-H3PO4 solution (pH=5.0)，the working voltage at 30kV，temperature at 20℃，UV detection at 200nm，sampling injected 5 seconds with voltage at 8kV.Results The established method had a good linearity and precision within the concentration range of 0.1～12.5μg/ml(R2=0.9998). The range of recovery was 96.8%～105.8%，and relative standard deviations of inter-day and intra-day were less than 6%. The detection limit was 10ng/ml.ConclusionThis assay was simple，rapid and sensitive. It is a new and ideal analytical means for the determination of lidocaine. 【Key words】 CZE； lidocaine； separation 利多卡因属于酰胺类中效局麻药，具有起效快、弥散广、穿透性强、安全范围较大、无扩张血管作用及对组织无刺激等特点，可用于多种形式的局部麻醉，也是抗心律失常的常用药物之一。硬膜外阻滞用量为400mg，其血药浓度达2～4μg/ml。当血药浓度超过5μg/ml时出现中毒症状，超过7μg/ml时出现惊厥［1］，因此其血药浓度监测具有重要的临床意义。以往多采用酶免疫分析法［2］、气相和高效液相色谱法［3］。但成本高，操作繁琐，干扰多，色谱柱易受污染等。而毛细管电泳（Capillary electrophoresis， CE）是20世纪90年代以来迅速发展起来的一种新型的分离检测手段，具有分离效率高、分析速度快、样品用量少、运行成本低、预处理简单以及应用范围广等技术优势，已在生物医药领域获得了许多成功的应用［4］。本研究结合利多卡因的结构特点，选用毛细管区带电泳（CZE）分离模式，优化缓冲体系、pH值、检测波长、分离电压和温度等条件，建立了适合利多卡因定量测定的CZE方法。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 毛细管电泳仪：美国Beckman公司P/ACE5000型配有紫外吸收（UV）、二极管阵列（PDA）和Beckman工作站；毛细管为涂层石英毛细管，57cm×75μm（河北永年光纤厂），有效长度50cm；PHS-3B精密pH计（上海精密科学仪器有限公司）；SB2200T超声波洗涤装置（必能超声上海有限公司）。 利多卡因（针剂，0.1g/5ml，山东兖州益健制药有限公司批号：0407182）；利多卡因标准品（宁夏医学院附属医院制剂中心 批号：030408）。NaH2PO4、H3PO4 、HCI和NaOH等试剂均为国产