氯化两面针碱的体内抑瘤作用及机制_药学论文.docVIP

氯化两面针碱的体内抑瘤作用及机制_药学论文 氯化两面针碱的体内抑瘤作用及机制_药学论文 【摘要】 　　目的研究氯化两面针碱对S180荷瘤小鼠的的抗肿瘤作用及机制。方法以荷瘤小鼠实体瘤瘤重为实验指标评价氯化两面针碱对S180移植性肉瘤的抑制作用，免疫组织化学方法检测肿瘤组织中的p53、Bcl-2和Bax蛋白。结果氯化两面针碱 2.5，5和10 mg·kg-1剂量对S180肉瘤生长的抑制率分别为1.95%，27.3%和42.9%，p53、bcl-2蛋白的表达率明显低于对照组，bax蛋白表达率高于对照组。结论氯化两面针碱对小鼠S180肉瘤有抑制作用，其机制可能与影响癌基因的表达有关。 【关键词】 两面针 氯化两面针碱 抗肿瘤 中药 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the anti-tumor effect of Nitidine chloride in vivo on Sarcoma180（Sl80）mice and its mechanism. MethodsThe antitumor effect of Nitidine chloride was evaluated by tumor weight. The expressions of p53、bcl-2 and bax proteins in the tissue were studied by immunohistochemistry. ResultsNitidine chloride significantly inhibited the growth of tumor, the inhibitory rate at the dose of 2.5，5，10mg · kg- 1 was 1.95%，27.3% and 42.9% respectively. The expression of p53，bcl-2 proteins was decreased obviously in the Nitidine chloride group as compared to control group, and the expression of bax was increased. ConclusionNitidine chloride has significant antitumor effect in vivo, and its influence on oncogene may be one of its anti-tumor mechanism. 　　Key words：Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC; Nitidine chloride; Anti-tumor; Traditional Chinese medicine 　　氯化两面针碱（Nitidine Chloride）是从广西特有药用植物两面针Zanthoxylum nitidum (Roxb)DC的根中分离到的具有抗肿瘤活性的生物碱，据文献［1］报道，对LEWIS肺癌、人体鼻咽癌、肝癌、慢性粒细胞白血病等均有抑制作用。本课题组前期研究也证实［2］，氯化两面针碱在体外能显著抑制口腔鳞癌KB细胞的增殖，可导致细胞周期G2/M期阻滞，并诱导细胞凋亡。为较系统地研究氯化两面针碱的抗肿瘤活性，本实验采用小鼠移植性肉瘤S180模型，评价氯化两面针碱的体内抗肿瘤活性，并研究氯化两面针碱对原癌基因和抑癌基因的影响，探讨其可能的作用机制，为氯化两面针碱的进一步研究及开发利用提供依据。 　　1 材料与仪器 　　1.1 试剂和仪器 　　氯化两面针碱由广西中医药研究所分离提纯（纯度＞95%），阳性对照药环磷酰胺（CTX）购自江苏恒瑞医药股份有限公司（批；BCL-2，Bax，p53兔抗小鼠多克隆抗体购自SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY 公司：即用型二步法（非生物素）PV6001兔二步法检测试剂盒、DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司；超净工作台：苏州净化设备厂；病理组织切片机、病理图像分析仪：德国Leica公司。 　　1. 2 动物 　　昆明小鼠，SPF级，雌雄各半，体重（20±2）g，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（桂）2003-0003。小鼠S180肉瘤荷瘤鼠购自广西中医药研究所，由本实验室接种保存。 　　2 方法 　　2.1 小鼠S180肉瘤造模方法及检测指标 　　从S180传代小鼠腹腔抽取乳白色瘤液以生理盐水稀释，调节细胞密度为1×1010·L-1。台朌蓝染色，镜检细胞存活率≥95%。取待接种小鼠消毒腋下皮肤，于超净工作台上将瘤细胞悬液以每只0.2 ml接种于小鼠右侧腋窝皮下，30 min