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甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响_药学论文
甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响_药学论文
作者:杨涛,葛郁芝,罗骏,胡朗吉,张淑华,吴志婷
【摘要】 目的研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响,探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术,观察不同浓度的甘松挥发油对钠通道的影响。结果①浓度为1,3,5,10,20,100 μg /g甘松挥发油可浓度依赖性地抑制钠电流;②可使心肌细胞钠电流-电压曲线上移,但激活电位、峰电位及反转电位无改变;③使激活曲线向正电位方向变化,V1/2从(-43.65±0.98)mV右移至(-40.25±1.01)mV(n=6,0.05);④使失活曲线向负电位方向变化, V1/2从(-100.92±0.68)mV左移至(-111.20±0.86)mV(n=6,0.05)。结论甘松挥发油可通过浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞膜钠通道电流,在不同膜电位水平对钠通道电流具有均匀一致的抑制作用;使激活曲线右移,使失活曲线左移。
【关键词】 甘松 膜片钳 钠通道 心肌细胞
Abstract:ObjectiveTo observe the effects of the volatile oil of Nardostachys chinensis on sodium channel in isolated ventricular myocytes.MethodsSingle ventricular myocyte of rat was obtained by enzymatic dissociation method.The whole-cell patch clamp recording technique was used to record the change of sodium current by diferent dosages of the volatile oil of Nardostachys chinensis from 1 to 100 ppm.ResultsThe volatile oil of Nardostachys chinensis decreased sodium current in a dose-dependent manner. The current-voltage curve moved up while active potential,peak potential and reverse potential had no change.The activation curve moved to more positive potential and the inactivation curve moved to more negative potential.ConclusionThe volatile oil of Nardostachys chinensis could decrease sodium channel current in a dose-dependent manner,the activation curve is shifted towards the depolarizing direction and the inactivation curve is shifted towards the hyperpolarizing direction.
Key words:Nardostachys chinensis; Patch-clamp techniques; Sodium channel; Myocardium
甘松为败酱科甘松属植物,具有抗心律失常作用[1,2],甘松挥发油是甘松有效浓缩成分[3],其抗心律失常的机制已有初步研究[4]。本研究应用膜片钳全细胞记录技术,观察甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道电流(INa)的影响,从离子通道水平探讨其作用机制。
1 材料与仪器
1.1 材料健康成年雌雄性大鼠,体质量250~300g,由南昌大学医学院动物所提供。甘松挥发油由江西省樟树市中医药研究所提供,用阴干后的甘松样品1 000 g,按《中国药典》Ⅰ部甲法进行水蒸馏,经6 h后停止加热,静置过夜,油水相分离后得浅绿色油状液体[5]。I型胶原酶(collagenase I)、HEPES(N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸),CsC1(氯化铯),谷氨酸,TEA-C1(氯化四乙胺),Na2ATP,EGTA为Sigma公司产品。其它试剂均为国产分析纯。
1.2 仪器膜片钳放大器(Axopatch 200B)及DigiData 1200B型数/
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