番泻叶提取物诱导小鼠结肠组织中蛋白质的差异表达_医学论文.docVIP

番泻叶提取物诱导小鼠结肠组织中蛋白质的差异表达_医学论文 番泻叶提取物诱导小鼠结肠组织中蛋白质的差异表达_医学论文 作者：王新　张宗友　时永全　兰梅　马征　金建平　樊代明 【关键词】 番泻叶 　　关键词: 番泻叶小鼠结肠蛋白质双向聚丙烯酰胺凝胶电泳银染 　　摘 要:目的 建立和优化蛋白质分子差异展示的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，初步观察番泻叶提取物诱导小鼠结肠组织中蛋白质的差异表达，为进一步筛选其中介导番泻叶生物作用的蛋白质分子奠定基础. 方法 应用番泻叶提取物灌胃制备小鼠慢性胃肠运动增强模型，提取其结肠组织中总蛋白质，优化蛋白质分子差异展示的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，并用其分析模型动物结肠组织中蛋白质，双向电泳凝胶银染法显示其蛋白质的差异表达. 结果 建立了小鼠慢性胃肠运动增强模型，优化了双向聚丙烯酰胺凝胶电技术并用其展示出模型动物结肠组织中有差异蛋白质的表达. 结论 番泻叶提取物可以诱导小鼠结肠组织中蛋白质差异表达，这些差异蛋白质可能介导了番泻叶的生物作用. 　　sional（2-D）polyacrylamide gel electrophoresis（PAGE）for investigating the different expression of colonic proteins in BALB/c mice induced by extract of senna，and to lay the foundation for screening and characterization of biological molecules mediating the effect of senna from the gastroin-testinal tract.METHODS The model of chronic gastroin-testinal motility hyperfunction in mice was established by in-tragastric administration of senna extraction.The proteins of colon was extracted from control and model mice.The2-D PAGE was optimized for analyzing the different expression of proteins.The2-D PAGE gels were stained with silver stain┐ing.RESULTS An animal model of chronic gastrointestinal motility hyperfunction was established in mice.Optimized2-D PAGE displayed the different expressional proteins in gas-trointestinal tract of model mice.CONCLUSION The dif-ferent expression of colonic proteins can be induced by extract of senna in BALB/c mice.These proteins maybe mediate the effect of senna in gastrointestinal tract. 　　0 引言 　　胃肠运动障碍是目前消化系统中最常见的疾病之一，研制新型的胃肠动力药物也是当今的热点.番泻叶是具有促进胃肠运动作用的传统中药，由于它的化学成分复杂，目前对其作用机制尚不清楚.我们通过建立小鼠胃肠运动增强模型，用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术观察其结肠组织中蛋白质的差异表达，研究番泻叶致泻和促进胃肠运动作用的分子机制，筛选和鉴定胃肠道组织中介导番泻叶作用的蛋白质分子，为研制新型的胃肠动力药物奠定基础. 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 印度进口番泻叶购自陕西省药材公司，经第四军医大学药物研究所鉴定为狭叶番泻叶，番泻叶提取物由第四军医大学药局制备，番泻叶经蒸馏水洗后，100℃煮沸10min，过滤后的沉渣再加水煮沸10min，收集滤液于70～80℃减压浓缩成流浸膏，浓度为1kg L-1 生药，封装于高压消毒的玻璃瓶中，-20℃冻存备用.丙烯酰胺，甲叉双丙烯酰胺，SDS，三（羟甲基）氨基甲烷，苯甲基磺酰氟均购自华美生物工程公司，超纯尿素购自上海生物工程公司，两性电解质pH3.5～10，pH6～8购自上海丽珠东风技术有限公司，GF-1高速组织分散器为江苏麒麟医用仪器厂生产.DYY-Ⅲ26型双向电