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研究捷安肽素抗真菌作用机理_药学论文
研究捷安肽素抗真菌作用机理_药学论文
【摘要】 目的 研究捷安肽素的抗真菌作用机理。方法 采用形态学方法和同位素标记法。显微形态观察经捷安肽素处理后的供试真菌的形态学变化。进一步采用14C同位素标记的特异底物“尿苷二磷酸-(14C)-葡萄糖”示踪,研究捷安肽素对真菌(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶活性反应的影响。结果 显微形态观察表明,经捷安肽素处理后,供试真菌呈现球形膨胀,而且随着捷安肽素作用强度增强,球形膨胀的程度和发生频率也增加,提示捷安肽素的作用位点在真菌细胞壁。同位素标记实验表明,捷安肽素可抑制(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶的活性,降低真菌细胞壁合成过程中(1,3)-β-D-葡聚糖的放射性掺入,对疫霉菌和辣椒炭疽病菌(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶的抑制率分别达到77.7%和77.5%。结论 捷安肽素的抗真菌作用机理为:抑制细胞(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶的活性,破坏真菌细胞壁的合成,造成真菌细胞壁组分(1,3)-β-D-葡聚糖的缺损和病原真菌生长抑制。
【关键词】 捷安肽素;抗真菌作用机理;(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶 Abstract:Objective To investigate the antifungal mechanism of Jiean-peptide.Methods The mode of action of Jiean-peptide against 4 phytopathogenic filamentous fungi associated with phytopathy:Phytophthora sp.,Colletotrichum gossypii,Southw Botrytis cinerea and Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum was investigated by the method of morphology and isotope labelling.The (1,3)-β-D-glucan synthase assay was processed using isotope labelled substrate—urdine diphosphate(14C)glucose to study the effect of Jiean-peptide on fungal(1,3)-β-D-glucan synthase.Results Micrographic observation revealed that the Jiean-peptide made the hyphal expanded and globular.The(1,3)-β-D-glucan synthase assay showed Jiean-peptide could inhibit the activity of(1,3)-β-D-glucan synthase and reduce the radioactivity incorporation of(1,3)-β-D-glucan.The inhibition percentages of Jiean-peptide against Phytophthora sp.and Colletotrichum gossypii Southw were 77.7% and 77.5% respectively.Conclusion The antifungal mechanism of Jiean-peptide was the inhibition of enzyme activity of(1,3)-β-D-glucan synthase.
Key words:Jiean-peptide;antifungal mechanism;(1,3)-β-D-glucan synthase 捷安肽素是一种由芽孢杆菌产生的抗真菌活性多肽,具有广谱抗真菌活性,而且稳定性好、抑菌持久,具有很好的开发前景[1,2]。从捷安肽素对疫霉菌、辣椒炭疽病菌、灰霉菌、棉花枯萎病菌等多种常见重要植物病原真菌的抑菌性能可知,捷安肽素可以通过抑制真菌孢子萌发、菌丝生长而发挥抗真菌生长作用。形态观察发现,捷安肽素可以破坏真菌的细胞壁结构,使真菌细胞呈现原生质球状[3]。(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶(EC2.4.1.34;尿苷二磷酸-葡萄糖/(1,3)-β-D-葡聚糖-3-β-葡糖基转移酶)是一细胞膜结合酶,在细胞膜内侧聚合UDPG形成葡聚糖纤维,葡聚糖纤维分泌出细胞膜形成网状支架,对真菌细胞壁的完整性及保护真菌抵抗低渗透压起重要作用[4,5]。本文作者采用形态学方法和同位素标记法研究捷安
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