第八章化学毒物的生殖毒性与致畸作用.pptVIP

第八章 化学毒物的生殖发育毒性 §1 概 述 生殖发育（繁殖过程）:从配子形成直到胎儿娩出的整个过程。 生殖发育过程较机体其他系统更为敏感。 外源化学物对生殖发育过程影响的范围较为广泛和深远。 生殖毒理学：主要研究外源化学物对生殖细胞发生、卵细胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳过程的损害作用及其评定。 发育毒理学:主要研究外源化学物对胚胎发育、胎仔发育以及出生幼仔发育的影响及其评定。 §2 发育毒性 一、基本概念 发育毒性：出生前经父体和（或）母体接触外源性理化因子引起的、在子代到达成体之前出现的有害作用。作用的特点及表现： 1）生长迟缓 2）致畸作用 3）功能不全或异常 4）胚胎或胎仔致死作用 畸形：器官形态的异常 畸胎：畸形的胚胎或胎仔 致畸物：一定剂量下，通过母体对胚胎或胎儿正常发育过程造成干扰，使子代出生后具有畸形的化合物。 二、致畸作用的毒理学特点 器官发生期的胚胎对致畸物最为敏感 剂量与效应关系较为复杂 物种差异以及个体差异在致畸作用中较为明显 三、致畸作用的机制 基因突变和染色体畸变 致畸物的细胞毒性作用 母体及胎盘的正常功能受到干扰 酶的抑制 对细胞膜造成损伤 干扰正常胚胎分化 生物合成的原料和能量不足 （一）动物致畸试验 1、基本原理 致畸试验是检查受试外源化学物能否通过妊娠母体引起胚胎毒性或后代畸形的动物试验。 胚胎在器官形成期，可因受到化学物或放射性物质的作用，使细胞分化、器官形成和正常发育受到阻滞，以致出现胎仔器官的器质性缺陷而呈现畸形。因此可以通过观察妊娠母体在敏感期接触受试物后胚胎及胎仔的发育状况来评价某种外源化学物有无致畸作用。 2、基本方法 （1）动物选择：首选动物为大鼠 优点：对大多数外源化学物的代谢过程基本与人类接近；受孕率较高（8～12只/窝），易获得所需样本；胎仔大小适中，易观察畸形情况。 缺点：对外源化学物的代谢率较快，对致畸物的易感性较低，易出现假阴性结果；胎盘结构与人类有一定差异。 （2）剂量分组 一般原则：要求出最大无作用剂量，以及引起致畸的阈剂量，同时还要保持母体生育能力，不致母体大批流产和过多胚胎死亡，也应避免较多母体死亡。 至少设三个剂量组，另设对照组： (3)动物交配处理 雌雄按1:1或2:1同笼交配； 孕鼠随机分组，大鼠或小鼠每组10～20只；家兔8～12只； 雌鼠妊娠的7～15天染毒，常用灌胃方式 （4）动物剖检与胎仔检查 分娩前1～2天，一般大鼠受孕后19～20天，小鼠18～19天，家兔在第29天 。 （5）结果判定方法 常用评价指标： 1）活产幼仔平均畸形出现数 2）畸形出现率 3）母体畸胎出现率 注意点 1）任何结果必须通过统计计算方法进行剂量组与对照组对比，必须具有统计学意义才能认为是阳性结果。 2）应该掌握所用实验动物品系的自然畸形发生率，不轻易作出具有致畸作用的结论。 3）致畸作用中动物物种和品系差异较为显著，因此要求在两种动物进行试验。 4）由于物种差异对动物不具有致畸作用的外源化学物对人是否致畸的问题，即将动物试验结论推论至人，沿无理想可靠的方法。 （6）致畸物及发育毒物危险度评定 致畸指数： 母体LD50与胎仔最小致畸作用剂量之比，即母体LD50／胎仔最小致畸作用剂量。这一比值愈大，致畸作用愈强，一般认为比值10以下者，不具致畸作用，10～100具致畸作用，100以上致畸作用强烈。 化学物致畸潜力分类和安全系数的确定（P226） ICE人类用药危险度分类（P226） 根据动物试验为群调查资料对致畸物分级（P226） 二、体外致畸作用试验法 全胚培养： 器官培养： 细胞胚培养： §3 生殖毒性及其评定 一、生殖毒性表现 对生殖过程的损害作用，可以表现为性淡漠、性无能或各种形式的性功能减退。雌性可出现排卵规律改变、月经失调或失经、卵巢萎缩、受孕减少、胚胎死亡、生殖能力降低、不孕或不育等。雌性可表现为睾丸萎缩或坏死、精子数目减少。 二、雄性生殖毒性评价 （二）外源化学物的雄性生殖毒性 1、对睾丸生精细胞的影响 棉酚：破坏生精上皮。 长期食用，组织学观察中可发现睾丸的生精上皮丢失； 电子显微镜观察，可见睾丸内精子、精细胞和精母细胞受损，对精子影响主要表现精子细胞的顶体肿胀、分离与碎裂，精子中段的线粒体螺旋鞘排列紊乱，嵴目减少。 还可以直接作用于精子，使其活力受到抑制。 二硫化碳：引起睾丸萎缩，精子生成障碍。 氯化汞：大鼠睾丸生精细胞凋亡增加 丙烯酰胺：大鼠精子数目和活力下降及形态改变和生育能力下降 重金属：铅对睾丸的形态和功能造成损害；镉引起睾丸退行性变化，睾丸、精囊、附睾的平均重量明显减轻，输精管中精子数目和精液中完整的精子大为减少。 动物实