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羊胎盘与细胞生长因子 羊胎盘营养成分 各种生长因子:生长因子虽然是微量物质,但是具有强烈促进体内各种细胞成长及增殖的作用,包括神经生长因子、表皮生长因子等。 SA氨基酸:超活化氨基酸。 脂多糖体:透明质酸、软骨素酸等。 维他命:维他命B1、维他命B2、维他命B6、维他命C、维他命E、菸酸等。 矿物质:钙、钠、钾、磷、锌、铁等。 核酸构成物质:尿嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、尿核苷、黄嘌呤、次黄嘌呤、鸟苷等。 糖类:葡萄糖、半乳糖、蔗糖。 脂质、脂肪酸:胆固醇、磷脂酸、磷脂酰、乙醇胺、月桂酸、棕榈酸等。 酶素类:碱性磷酸脂酶、透明质酸酶等五十五种以上。 蛋白质:白蛋白、球蛋白等。 氨基酸:门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸等十八种氨基酸 (参与蛋白质合成的常见的是20种L-α-氨基酸 ) 羊胎素中的氨基酸组成 羊胎素中含有18种氨基酸(水解后) 门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、肤氨酸、撷氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸、色氨酸的含量分别为5.80%、3.76%、3.25%、12.00%、9.30%、5.76%、0.85%、4.37%、1.83%、3.48%、7.20%、2.36%、3.44%、3.95%、1.58%、6.03%、4.78%、0.95%,氨基酸总量达80.69%。 其中人体所必需的氨基酸总量为31.24%,必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA)为38.72,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)达到63.17。 生长因子 生长因子定义:具有刺激细胞生长活性的细胞因子。一类通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合,调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。存在于血小板和各种成体与胚胎组织及大多数培养细胞中,对不同种类细胞具有一定的专一性。 生长因子种类:生长因子有多种,如血小板类生长因子(血小板来源生长因子,PDGF;骨肉瘤来源生长因子ODGF)、表皮生长因子类(表皮生长因子EGF、转化生长因子TGFα和TGFβ)、成纤维细胞生长因子(αFGF、βFGF)、类胰岛素生长因子(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)、神经生长因子(NGF)、白细胞介素类生长因子(IL-1、IL-1、IL-3等)、红细胞生长素(EPO)、集落刺激因子(CSF)等。 羊胎素美容风靡全球,它与EGF表皮生长因子护肤液有何不同? 羊胎素是动物胎盘的提取物,科学研究表明,羊胎素之所以有美容作用,主要是因为其中含有极微量的动物表皮生长因子EGF。但是动物EGF与人体的EGF的分子结构有很大的差异。(但文献中报道为:不同来源的EGF的结构略有差异,一般同源性在 70%左右。)EGF护肤液采用的是基因技术生产出与人同源的表皮生长因子(EGF),因此不存在任何排异性,更易于被人体吸收,安全、可靠、高效。 山羊颌下腺EGF制备流程 山羊领下腺EGF生物活性鉴定 ELISA法检测生物活性:所用方法为间接ELISA法; MTT法测定EGF活性:在酶标仪上,57onm波长下测吸光度A值,计算生长促进率; 山羊领下腺EGF小鼠萌齿和睁眼试验:观察组小鼠每天皮下注射EGF170ug/100ul/只,对照组每天皮下注射同体积的生理盐水,每天观察睁眼及萌齿情况。 尽管EGF己可用基因工程菌生产,但其制作成本高、产量低、价格十分昂贵(市售达us$220一1020/mghEGF)。山羊领下腺含有丰富EGF。本实验从143.0g羊领下腺冻干粉纯化到EGF约为96.0mg,而山羊领下腺制成冻干粉的得率为10%,这样总的得率为0.067mg/g。每只山羊领下腺约重10g,且山羊领下腺为宰杀后废弃产品,因此有丰富的来源。其制作成本低、得率高适应于我国临床治疗的需要。 最初EGF的分离纯化有1972年Savage用酸抽提、BIO一纤维柱和DEAE一纤维柱制备。而后有1975年cohen、carpenter从预处理的浓缩尿液中分离的5步法:Bio一Rex7o柱吸附、Bio一Gelplo柱过滤、Sephadex G一75柱过滤、DE一52、CM一52柱层析分离。不管从天然还是基因工程,EGF的初始浓度总是偏低,需要经过较长时间的分离和纯化过程,才能得到相对较纯的EGF。由于EGF是一种耐酸、热稳定的阳离子蛋白质,针对其特殊的理化性质,我们采用酸抽提法除去了绝大部分的杂蛋白,再经具分子筛效应的SePhadexG15凝胶层析及与阳离子不结合的DEAEsphacel层析柱,经SDS一队GE电泳分析其相对分子量为6kDa,与人EGF的分子量相近,再经ELISA法、MTT法及小鼠睁眼、萌齿试验证明山羊领下腺冻干粉经纯化后为EGF。与以往的提取纯化方法相比,本实验方法简单、提取纯化周期短。 * 纯化的羊表皮生长因子治
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