分析化学第20章毛细管电泳法.pdfVIP

第二十章 毛细管电泳法 仪器分析 第一节 概述 电泳 （Electrophoresis)是指溶液中带电粒子在电场的作用下向与自 身带相反电荷的电极移动的现象。将电泳发展成为分离技术应归 功于Tiselius 的工作。他于1937年建立“移界电泳（moving boundary electrophoresis)” ，成功地将人血清中的蛋白质分为白蛋 白、α、β、和γ球蛋白，这项工作成为蛋白质化学发展的基础，因 此Tiselius本人荣获1948年诺贝尔化学奖。 第二十章 毛细管电泳法 仪器分析 高效毛细管电泳 经典电泳法散热差，分离电压受到限制。 1981年，Jorgenson和Lukacs发表了在毛细管电泳发展史上具有划时代 意义的工作，他们采用75μm 内径的石英毛细管做为分离室，紫外柱上 检测的方法，在30kv 的分离电压下分离丹酰化氨基酸，柱效达到40万 个理论塔板。他们的工作为毛细管电泳的发展奠定了基础。 James W. Jorgenson North Illinois University 化学系教授 第二十章 毛细管电泳法 仪器分析 第二十章 毛细管电泳法 仪器分析 第二节 基本理论 一. 电渗  电渗（electroosmosis)是毛细管电泳分离理论中最基本的概 念之一。 电渗是指在电场作用下，毛细管中或固相多孔物质内， 液体沿固体表面移动的现象。电渗与固液两相界面的双电 层有着密切关系。 电渗速度uos 以下式表示： os u  E E os os 4 第二十章 毛细管电泳法 仪器分析  石英毛细管壁上的硅羟基在水 溶液中发生电离，所产生的 - SiO 负离子使毛细管壁带负电 荷。溶液中的抗衡离子靠静电 吸附和分子扩散在固液界面上 形成双电层（electric double layer)，双电层包括紧密层和 扩散层。 第二十章 毛细管电泳法 仪器分析  在电场作用下，固液两相间的相对运动发生在紧密层与扩散层之间的 滑动面上。 由于离子的溶剂化作用，当形成扩散层的离子在电场中移动时，携带 着液体一同移动，因此产生电渗流（electroosmotic flow,EOF ） HPLC由于压差产生抛物线型的流体流速轮廓。电渗流的流速轮廓 是一个平面，在毛细管中如同瓶塞一样流动，不存在径向的流速梯 度。这是毛细管电泳分离柱效高于HPLC的原因之一。