农杆菌介导GUS基因对多年生黑麦草转化的研究.pdfVIP

广 西 植 物 Guihaia 　27 ( 1) : 12 1 - 126 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 2007 年 1 月 　 农杆菌介导 GUS 基因对多年生黑麦草转化的研究 1 ,2 1 3 4 1 张振霞 , 刘 　萍 , 杜雪玲 , 苏　乔 , 杨中艺 ( 1. 中山大学 生命科学学院, 广州 510275 ; 2 . 韩山师范学院 生物系 , 广东 潮州 52 104 1 ; 3 . 安徽淮北煤炭 师范学院 生物系 , 安徽 淮北 235000 ; 4 . 大连理工大学 环境与生命学院, 辽宁 大连 116024 ) 摘 　要 : 通过检测愈伤组织中 GUS 基因的瞬间表达 ,研究农杆菌 LBA4404/ p CAMBIA 1301 介导多年生黑麦草 的转化体系 。通过对多年生黑麦草瞬间表达率的比较 ,确立了其遗传转化的最佳优化条件 。研究发现 ,多年生 黑麦草不同品种的转化率在 25 %～45 %之间变化 。多年生黑麦草遗传转化最佳优化条件是预培养 10 d 的胚性 μ 愈伤组织、浓度为0 . 5～0 . 8 OD 的农杆菌菌液以及2 d 共培养时间。在共培养基中添加 100 mol/ L 乙酰丁香酮 能有效地提高植物瞬间表达率 。两种侵染处理方法比较结果为滤纸滴加法比浸泡法更优 。转化后对愈伤组织 的干燥处理能抑制农杆菌过度繁殖 ,能改善愈伤状态 ,有利于提高转化率 。 关键词 : 多年生黑麦草; 农杆菌转化 ; GUS 基因 ( ) 中图分类号 : Q943 　　文献标识码 : A 　　文章编号: 2007 01012 106 Study on A g r ob act er i ummediated GU S transf ormation f or L ol i um p er en ne L . ZHAN G ZhenXia1 ,2 L IU Ping1 , DU XueLing3 , SU Qiao4 , YAN G ZhongYi1 ( 1. College of L if e S ciences , S un Yatsen University , Guangzhou 510275 , China ; 2 . Dep artment of B iology , H ans han N ormal College , Chaozhou 52 104 1 , China ; 3 . Dep artment of B iology , H uaibei Coal I ndust ry N ormal College , Huaibei 235000 , China ; 4 . S chool of Envi ronmental and B iolog ical S ciences , D alian University of Technology , Dalian 116024 , China ) Abstract : A g robacteri um t umef aciens mediated